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荧光Elispot图像分析仪的基本应用

荧光Elispot图像分析仪检测的数据是细胞频率（即在细胞群体中，受某种特异性抗原刺激而分泌某种细胞因子的阳性细胞占细胞总数的比例）。细胞总数在试验开始已经计数。需要统计的是阳性细胞（也称斑点形成细胞（spot forming cells，SFC）数目。根据以前的技术研究，科学界已形成共识，每一个ELISPOT斑点对应**一个阳性细胞。所以ELSPOT数据处理重要的工作就是进行斑点计数。

手工计数一般是使用双筒解剖镜，在放大25倍的解剖镜下，一个孔的底板刚好覆盖一个完整的视野。实验操作人员手持按压式的计数器，对孔内的斑点逐一计数。手工计数大的优点就是可以利用人脑的智慧与经验：比如可以适应各种大小的斑点，排除各种假阳性的斑点，能辨认复杂背景下的模糊斑点，等等。如果实验者只是偶尔小规模的做一做ELISPOT，手工计数仍然是优选。但是手工计数也有致命的弱点。

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