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高效液相色谱仪色谱图和峰参数介绍
摘要:高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。高效液相色谱仪色谱图和峰参数介绍
1
、色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile)。
2
、基线(baseline)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
3
、噪音(noise)――基线信号的波动。通常因电源接触**或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
4
、漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
5
、色谱峰(peak)--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leadingpeak)和脱尾峰(tailingpeak).前者少见。
6
、拖尾因子(tailingfactor,T)--T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetryfactor)或不对称因子(asymmetryfactor)《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T1.05为拖尾峰。
7
、峰底――基线上峰的起点至终点的距离。
8
、峰高(Peakheight,h)――峰的*高点至峰底的距离。
9
、峰宽(peakwidth,W)--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。
10
、半峰宽(peakwidthathalf-height,Wh/2)--峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ。
11
、标准偏差(standarddeviation,σ)--正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。
12
、峰面积(peakarea,A)――峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h。
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