应用管碟法测定****的抑菌效果（***效价）应用原理****从牛津杯底部向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌的抑杀作用而影响**生长繁殖，使菌落形成抑菌圈，依抑菌圈的大小确定****能力的强弱。通过实验观察****作用效果，熟练掌握管碟法体外测定**的**活性、应用管碟法测定****的抑菌效果（***效价）【材料】
1. 菌种：金黄色葡萄球菌，培养16~18**汤菌液；大肠杆菌O78，培养16~18**汤菌液。
2. 药品：青霉素G钠、恩诺沙星、硫酸庆大霉素、氟苯尼考。
3. 器材：生化培养箱、电热蒸汽**器、水浴锅、**肉汤琼脂培养基、酒精灯、平皿、吸管、牛津杯（标准不锈钢管）、镊子、滴管、记号笔、L形玻璃棒、游标卡尺等。
应用管碟法测定****的抑菌效果（***效价）【实验实训步骤】
1. 药液的配制与肉汤营养琼脂平板的制备。
⑴ 按要求准确称取一定量的****，用无菌蒸馏水配制成所需浓度的溶液。
⑵ 将**肉汤琼脂培养基溶化后取15ml倒入**培养皿内，放置一定时间凝固，作为底层培养基。
2. 用无菌吸管吸取试验菌的培养液0.1ml，滴在平皿底层培养基上，用无菌L形玻璃棒将菌液涂匀。
3. 在平皿底部作好相应标记，用无菌镊子在每个平皿中等距离放置4个牛津杯。
4. 用滴管分别将药液滴加到牛津杯中，以滴满为度，盖上平皿盖。然后将滴加药液的平皿放置在玻璃板上，再水平送入恒温箱内，37℃下培养16～24h。
5. 用游标卡尺测量抑菌圈直径，判定******作用的强弱。见图。
应用管碟法测定****的抑菌效果（***效价）【注意事项】
1. 应在无菌条件下操作，试验完毕后及时**处理，防止散毒。
2. 牛津杯放入培养基表面时，既要确保牛津杯底端与培养基表面紧密接触，以防药液从接触面漏出，又要防止牛津杯陷入平皿底部。
3. 加入牛津杯的药液量应相同。
图 管碟法测定的操作过程
【实验实训结果】见表。
表管碟法测定****的抑菌效果
| 菌种 | ** | 浓度 （μg/ml或IU/ml） | 抑菌圈直径（mm） | 判定结果 |
| 金黄色 葡萄球菌 | 青霉素G钠 | | | |
| 恩诺沙星 | | | |
| 硫酸庆大霉素 | | | |
| 氟苯尼考 | | | |
| 大肠杆菌 | 青霉素G钠 | | | |
| 恩诺沙星 | | | |
| 硫酸庆大霉素 | | | |
| 氟苯尼考 | | | |
【讨论与作业】利用****作用机制分析实验结果，阐述其临床应用的指导意义。
附：1. 药敏试验判定标准
表****的抑菌效果判定标准
| 抑菌圈直径（mm） | 敏感性 |
| <9 | 耐药 |
| 9~11 | 低度敏感 |
| 12~17 | 中度敏感 |
| >18 | 高度敏感 |
2. 肉汤琼脂培养基制法
牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂2.0g、蒸馏水1000.0ml，加热溶解后，调节pH至7.4~7.6，煮10min，冷却过滤，103.4kPa压力**15min备用。
