为了让大家了解分光光度计的定量分析方法,上海旦鼎技术人员做了以下总结,同时也为您介绍了紫外分光光度计的使用范围和波长范围,以及可见分光光度计与紫外可见分光光度计的区别。
一、分光光度计定量分析方法
定量分析是分光光度计用的*多的一种,定量分析的种类也比较多,以下将为您介绍几种常用的定量分析方法:
1、标准法
在选定的波长处,在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液C标和被测试样品溶液C样的吸光度A标和A样。然后,按下式求得样品溶液的浓度或含量。
C样=A样/A标×C标
2、*对法:
*对法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用*多的一种方法。这是一种以琅伯-比尔定律A=εbC为基础的分析方法,某一物质在一定波长下ε值是一个常数,石英比色皿的光程是已知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在λmax波长处,测定样品溶液的吸光度值A。然后,根据琅伯比尔定律求出C=A/εb,则可求出该样品溶液的含量或浓度。
3、标准曲线法
紫外可见分光光度计*常用的定量分析方法是标准曲线法。即先用标准物质配制一定浓度的溶液,再将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标,标准溶液对应得浓度为横坐标,绘制标准曲线。*后,将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。
![紫外分光光度计](http://y1.yzimgs.com/ComFolder/434003//201407/%E7%B4%AB%E5%A4%96%E5%88%86%E5%85%89%E5%85%89%E5%BA%A6%E8%AE%A1.jpg)
二、紫外分光光度计使用范围
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。
三、紫外分光光度计波长范围
可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、400~850nm的可见光区。主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。
四、可见分光光度计与紫外可见分光光度计的区别
常说的“UV”,一般指 紫外可见分光光度计
波长范围在:190-1100nm或190-900nm
可见分光光度计波长范围:325-1100nm等
主要区别在于检测范围不一样。
一般检测六价铬、甲醛等,可直接选择可见分光光度计。
而国标等标准中规定要在325nm以下检测的物质,
就需要用紫外(可见)分光光度计(一般含可见部分)
而决定波长范围的配件即是光源:卤氘灯(紫外用),钨灯(可见用)。
钨灯会比氘灯小一些。
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