首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会**些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
一般用微量分光光度计比较快速简便,DNA浓度会直接在软件上显示,A260 / A280的比值用于评估样品的纯度, 纯净的样品比值大于1.8,低于2.0。较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
![紫外分光光度计](http://y1.yzimgs.com/ComFolder/434003//201409/%E7%B4%AB%E5%A4%96%E5%88%86%E5%85%89%E5%85%89%E5%BA%A6%E8%AE%A1.jpg)
核酸的定量是分光光度计使用频率*高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的*高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者***的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。
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