紫外分光光度法原理及紫外分光光度法测量蛋白质含量原理,上海旦鼎技术人员将为您做详细讲解,希望能对您有帮助,欢迎浏览以下详细内容:
一、紫外分光光度法原理
紫外分光光度法的原理是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、**度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
二、紫外分光光度法测量蛋白质含量原理
1、紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收,可用于物质的鉴定和结构分析。
2、参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统,在紫外光区(220-300nm)显示特征的吸收谱带,*大光吸收(lmax)分别为279、278、和259nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基,因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。
因此可以用标准曲线法在280nm测样品吸光度,求得蛋白含量。
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