使用紫外分光光度法的注意事项：
1 仪器的校正和检定： 1．1 波长 由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行**校正检定外，还应于测定前校正测定波长。1．2 吸收度 吸收度的**度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。 1．3 狭缝宽度 选择仪器的狭缝宽度，应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于《中国药典》UV法测定的大部分品种，可以使用2nm缝宽，但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度检查则需要1nm缝宽或更窄，否则其264nm的吸收度会偏低。 1．4 天平和玻璃仪器的检定所用的容量仪器及分析天平应经过检定，如有偏差应加上校正值。 1．5 吸收池配对 石英吸收池对紫外光亦有吸收，1 em的吸收池在波长220～270 nm的范围内，以空气作为100％，其透光率往往小于100％，同时每个吸收池不可能完全相同，故在每次测定前应做吸收池配对试验。方法是取干燥洁净的吸收池，均装入测定用空白溶剂，以一只吸收池作空白，用测定时所用的波长测定其他吸收池的吸收度，*后选择吸收*小的一只作为配对，测定并记录下其它吸收池的吸收度，供试品液的实际吸收度应是与吸收池(有空白溶剂时)吸收度之差。为减少误差，常用一个配对杯测定若干样品(也减少计算麻烦)，但应注意换液时充分洗涤。
2 对溶剂的要求：由于溶剂与溶质分子间形成氢键、偶极化等的影响，可以使溶质吸收波长发生位移。通常极性溶剂比非极性溶剂的影响大，在选择溶剂时应予以注意。测定供试品前，应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否有吸收峰，是否影响供试品测定。每次测定时应采用同一厂家、同一批号的试剂配制混合均匀的同一批溶剂。
3 检验： 3．1 溶液配制 称量应按药典规定进行。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少，转移稀释时所取容积一般应不少于5mL。含量测定供试品应称取2份，如为对照品比较法，对照品也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份，平行操作。每份结果对平均值的偏差应在4-0.5％以内。作鉴别或检查时可取样品1份。3．2 测定 除另有规定外，应在规定的吸收峰波长4-2 nm以内，再测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰***长应在该品种项下规定的波长4-1nm以内，否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的**度。取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。样品溶液的量以池体积的4／5为宜，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无残留溶剂，为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭，然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放人样品室时应注意每次放入的方向相同。使用后用洗涤剂及水冲洗干净，晾干防尘保存。吸收池如污染不易洗净时可用发烟硫酸+硝酸(3：1 )混合液稍加浸泡后，洗净备用。如用铬酸钾清洁液清洗时，吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡，否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面，并应充分用水冲洗，以防铬酸钾吸附于吸收池表面。
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