分光光度计*常见的用途和常用波长
1.核酸的定量核酸的*高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。 A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。 A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。
2.蛋白质的直接定量这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。
3.**细胞密度**培养过程中,需要采用分光光度计**测定**细胞密度。 OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。在600nm波长下,以未加菌液的培养液作为空白液,测量定量培养后的含菌培养液。
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