二氧化碳培养箱的选择和操作，由于动物细胞培养液一般使用碳酸盐pH缓冲系统，要求培养环境中维持一定浓度的CO2，所以动物细胞的培养一般需要CO2培养箱。CO2培养箱采用两种不同的CO2维持系统。一种方式是通过使用空气泵，将CO2和空气按一定比例混合后吹入培养箱。另一种方式是通过一个自动的CO2检测控制系统，在检测到CO2浓度低于要求浓度时打开CO2气阀充入CO2。由于前一种方法耗费CO2而且不容易**控制CO2浓度，**的CO2培养箱都采用自动监控系统来维持CO2的浓度。配有自动CO2检测控制系统的培养箱需要根据生产厂家的说明，定期做CO2浓度的测试和矫正。
二氧化碳培养箱的隔热采用水套式和气套式两种类型。气套式采用隔热系统和表面散热元件使培养箱内温度均衡，但是因为外部电热系统分布不均衡可导致培养箱内上下温度不一至，温差相对较大。水套式需要用户在安装培养箱时培养箱壁的空间内灌入大量蒸馏水。由于水的比热容很高，水套式的*点是有助于均匀散热和避免形成冷区，以及在断电后能够比较好的减缓培养箱内温度的降低。水套式因4周环水，所以温度均匀性很好。新型的CO2培养箱大多采用水套式。
二氧化碳培养箱一般配一个水盘，用以维持很高的湿度。水盘内的水要定期添加，水盘也要定期清洗以避免微生物的生长。为了减少微生物的污染，有一些CO2培养箱提供**功能。有的可以加热到比较高的温度来**，有的则通过让空气循环通过一个紫外线腔体的办法来**，这样就**时就不需要中断细胞的培养。
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