使用紫外可见分光光度计必看知识

紫外可见分光光度计是实验室必备仪器之一，主要是用来对物质做定性、定量分析。可广泛应用于生化化学、石油化工、环境保护、医疗卫生、临床检验等领域。

1.紫外可见分光光度计的外光路系统一般由光源、反射镜或透镜组成。光源一般都是由氘灯和钨灯( 卤钨灯) 及其灯架组成, 反射镜一般用凹面反射镜,有些仪器的外光路系统采用透镜或柱面镜。这些镜子的作用是把光源发出的光成像在单色器的入射狭缝上, 或者说, 把光源发出的光集中到单色器的入射狭缝上, 并均匀照明单色器的入射狭缝。所以说, 光源的灯丝和入射狭缝是物像关系。

2.紫外可见分光光度计的外光路大体上有以下四种形式。①氘灯和钨灯位于凹面反射镜的同侧。光源切换是通过电机带动平面反射镜移动来实现的。②氘灯和钨灯位于凹面反射镜的两侧。氘灯和钨灯固定不动( 见图3-12) , 光源切换是通过电机带动凹面反射镜震动来实现的。③氘灯和钨灯固定在一个组座上。凹面反射镜是固定的(见图3-13)。光源切换是通过电机带动氘灯和钨灯固定组座移动来实现的。④氘钨灯固定在凹面反射镜的一侧。若采用氘钨灯( 氘灯和钨灯作在一起) , 则氘钨灯位于凹面镜的左侧或右侧, 凹面镜固定不动, 光源通过凹面镜成像在入射狭缝上。
       

光度重复性的测试方法很简单。一般是选定一个标准样品（也可用使用者自己任选的样品），，由同一个操作者，进行3-5次测试，再计算光度重复性。具体操作方法为：仪器冷态开机（即关机2h后开机），预热半小时后，对标准样品或使用者自选的样品进行光谱扫描，然后，在谱图上选择几个特征吸收峰，检查在选定的测量次数内，各个峰值的*大值与*小值之差即为光度重复性。人们经常将光度**度和光度重复性在一次操作中完成。

**度和线性是两个完全不同的概念。**度是实验值与真值之差，而线性则是实验点偏离比耳定律直线部分的程度，两者不能混淆。应该指出，**度一般不能直接反映仪器的线性和线性范围，线性和线性范围一般也不能直接反映仪器的**度。

1.测试试样是否光解：由于紫外可见分光光度计紫外光照射样品，致使试样发生光化学反应，从而引起样品的浓度变化，会使测试结果不**。这种现象的发生时，应注意对样品进行避光保护，一般是用黑纸包住样品或采用棕色器皿装样品。

2.测试波长是否合适：由于测试波长不合适，可能会因为摩尔吸光系数不同，致使灵敏度不同，所以产生分析测试误差。因此，要认真选择测试波长。一般来说，要选择*大吸收波长作为测试波长，可**得到较大的信号，从而提高性噪比，**分析测试数据的可靠性。

3.测试比色皿是否沾污：比色皿沾污是很重要的问题，有时测试熏差增大，就是比色皿沾污的结果。除数据不准外，有时，出怪峰、负峰，也是比色皿沾污所引起的。如比色皿沾污，可用20W的玻璃仪器超声波清洗30min，一般都可以解决问题。但是*不能采用大功率超声波来清洗比色皿，否则会损坏比色皿。目前国内外的各类比色皿，一般都分为烧结或粘接两种。不管是哪一种，只要用大功率超声波清洗，肯定会毁坏比色皿。所以，使用者一定要认真对待比色皿沾污的问题。
       

1.温度和湿度是影响可见分光光度计性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起PH溶解氧仪部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。

2.环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘等。
       3.紫外可见分光光度计使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，*好由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，*后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录