分光光度计是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。可广泛应用于制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面，下面将为您详细介绍分光光度计。
一、分光光度计的分类（按照波长及应用领域划分）
1.紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区。
2.可见光分光光度计：测定波长范围为400～760 nm的可见光区。
3.红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区。
4.荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱。
5.原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
二、分光光度计工作原理
分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
三、分光光度计的基本结构
1.显示器
显示器是将光电管或光电倍增管放大的电流通过仪表显示出来的装置。常用的显示器有检流计、微安表、记录器和数字显示器。检流计和微安表可显示透光度（T%）和吸光度（A）。数字显示器可显示T%、A和C（浓度）。
2.检测器
检测器是将透过溶液的光信号转换为电信号，并将电信号放大的装置。常用的检测器为光电管和光电倍增管。
3.比色杯
比色杯又称为吸收池或比色皿。比色杯常用无色透明、耐腐蚀和耐酸碱的玻璃或石英材料做成，用于盛放待比色溶液的一种装置。
4.单色器
将来自光源的复合光分散为单色光的装置称为分光系统或单色器。单色器可分成滤光片、棱镜和光栅。滤光片能让某一波长的光透过，而其它波长的光被吸收，滤光片可分成吸收滤光片、截止滤光片、复合滤光片和干涉滤光片。
5.光源
光源指一种可以发射出供溶液或吸收物质选择性吸收的光。光源应在一定光谱区域内发射出连续光谱，并有足够的强度和良好的稳定性，在整个光谱区域内光的强度不应随波长有明显的变化。实际上许多光源的强度都随波长变化而变化。为了解决这一问题，在分光光度计内装有光强度补偿装置，使不同波长下的光强度达到一致医学教育。
四、分光光度计测量方式
在一定的环境中应用分光光度计*常用的定量分析方法是标准曲线法。即先用标准物质配制一定浓度的溶液，再将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下，测试每个标准溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，标准溶液对应得浓度为横坐标，绘制标准曲线。*后，将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。
五、分光光度计使用方法
1.使用分光光度计前，应先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的**性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。并在使用前先检查放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧)，如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率*小)。
3.开启分光光度计电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光门自动关闭)，调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5.如显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6.预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。
7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9.如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，(因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间)，当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作，吸收池(即比色杯)。
六、分光光度计使用注意事项
1.分光光度计在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书。
2.若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新调零及满度后，再测量。
3.指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。
4.操作人员不应轻易触动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。
5.分光光度计放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。
七、分光光度计常见故障处理
1.样品出峰位置不对
这是由于波长传动机构产生位移，应检查通过氘灯的656.1nm的特征谱线来判断波长是否**，对于**仪器而言处理手段相对简单，使用仪器固有的自动校正功能即可;而对于相对简单的仪器，这种调整则需要**人员来调修。
2.没有任何检测信号输出
这是由于没有任何光束照射到样品室内的原因应将波长设定为530nm，狭缝尽量开到*宽档位，在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处，观察白纸上有无绿光斑影像。检查光源镜是否转到位，双光束仪器的切光电机是否转动了(耳朵可以听见电机转动的声音)。
3.样品室内无任何物品的情况下，全波长范围内基线噪声大
这是由于光源镜位置不正确、石英窗表面被溅射上样品，应观察光源是否照射到入射狭缝的中央，石英窗上有无污染物。再重新调整光源镜的位置，用乙醇清洗石英窗。
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