一、固相萃取概念及基本原理：
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的
一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要通过固
相填料对样品组分的选择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。
主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。
固相萃取的基本原理和方法：
SPE 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进
行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似
的看作一种简单的色谱过程。
固相萃取(SPE)是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用
的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲
去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再
使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。
二、固相萃取方法的优点
相对于传统的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有无可比拟的优势：
**章 固相萃取(SPE)技术介绍
净化方法 优点 缺点
LLE
(液液萃取)
PPT
(蛋白沉淀)
SPE
(固相萃取)
无需特殊装置和材料
操作简单，无需特殊装置
1.集样品富集及净化与一身，提
高检测灵敏度的*佳方法
2.比液液萃取更快，节省溶剂
3.可自动化批量处理
4.重现性好
1.操作繁琐，费时
2.需要耗费大量的有机溶剂，导致高成本
和对环境的污染
3.难以从水中提取高水溶性物质
1.非特异性的沉淀反应可能使微量的分析
物随着基质蛋白质共同沉淀而损失
2.净化效果较弱，检测灵敏度和可靠性低
1.使用进口固相萃取小柱的成本较高三、固相萃取装置及基本操作步骤
1．固相萃取柱
1)SPE小柱
关于固相萃取小柱：
a.常见的固相萃取柱分为三部分：医用聚丙烯柱管，多孔聚丙烯筛板(20μm)和
填料(多为40-60μm，80-100μm)(见图1)。
b.常用规格：100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml为例其中100mg为填料的质量，1ml是空柱管的体积。
c.一次性使用：为避免交叉污染，保证检测可靠性，SPE柱通常是一次性使用的2)96孔板
96孔板是高通量的SPE产品，每孔含少量吸附剂(10-100mg), 样品载量约2ml/孔(见图
2)主要用于生物，医药等行业小量的多样品的净化处理。且多与自动化的样品处理处
理装置连用(如Tomtec液体处理工作站)。其基本原理和使用方法与SPE柱相似。
2.需要专业人员协助方法开发
2．固相萃取装置
1)真空SPE装置(SPE Vacuum Manifolds)组成：玻璃缸，真空压力表，真空泵，
真空缓冲瓶，收集管架，小柱连接头，大体积取样器，12位或24位防交叉污染装
置(见图3)。
标配StopCock阀，**控制流速
试管架高度可调，满足不同体积需要
压力表放空阀侧面设计，使用方便
设计紧凑、经久耐用、性价比高
2)自动化固相萃取装置
a.医药/环保/刑事鉴定中自动样品前处理
b.自动进行固相萃取/可多组份收集
c.无人为影响，无乳化，节省溶剂
d.高回收率，高重现性，高效率适用于各
种商品萃取柱
e.自动记录资料，便于GLP管理
f.特别适合于HPLC或LC/MS的样品处理
g.价格较高
图3 固相萃取装置
图4 自动化固相萃取装置
真空固相萃取装置
规格
12位
24位
订货号
M0401001
M0401002
价格
6500.00
11000.00
3．基本操作步骤
针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质)，操作稍有不同。
1)填料保留目标化合物
固相萃取操作一般有四步(见图5)：
活化——除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
上样——将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。
淋洗——*大程度除去干扰物。
洗脱——用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
2)填料保留杂质
固相萃取操作一般有三步：
活化——除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
上样——将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基
液流出，杂质被保留在柱上。故此步骤要开始收集。
洗脱——用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集。合并收集液。
此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。
一、固相萃取填料分类：
目前常见的填料按填料类型共分为4类：
1．键合硅胶：C18(封端),C18-N(未封端),C8,CN,NH2,PSA,SAX,COOH,
PRS,SCX,Silica,Diol。
在SPE中*常用的吸附剂是硅胶或键合相的硅胶即在硅胶表面的硅醇基团上键合
不同的官能团。其pH适用范围2-8。键合硅胶基质的填料种类较多，具有多选择
性的优点。
2．高分子聚合物：PEP,PAX,PCX,PS,HXN。
上世纪90年代末，为扩大反相固相萃取材料的适用范围和改善吸附平衡性，并提
高重现性，以极性官能化高分子树脂为主体的新型反相固相萃取材料问世了。此
类填料是以乙烯吡咯烷酮和二乙烯萃共聚得到的高分子聚合物，由于吡咯烷酮极
性官能团的引入，这类萃取柱对各类极性、非极性化合物具有均衡的吸附作用。
克服了传统C18柱存在的缺点。(详见第19页)
此类填料的代表产品有：Cleanert PEP, Oasis HLB，Cleanert PCX, Oasis MCX,
Cleanert PAX, Oasis MAX等。
3．吸附型填料：Florisil(硅酸镁),PestiCarb(石墨化碳),氧化铝(Alumina-N中性Alumina-A 酸性；Alumina-B 碱性)。
4．混合型及专用柱系列：PestiCarb/NH2
SUL-5(磺胺专用柱)
HXN(磺酰脲除草剂专用柱)
DNPH-Silica(空气中醛酮类化合物检测专用柱)
**章 常见的固相萃取填料