m6A 202003：检测RNA和DNA的N6-甲基腺苷（m6A）修饰
一、背景资料
m6A(N6-甲基腺苷)是一种转录后的RNA修饰，在所有种属中都有发现，例如在脊椎动物的snRNAsU2、U4、U6中，在病毒和真核生物的mRNAs中，以及在大肠杆菌的16SrRNA中。zui近的研究发现，mRNA主要是在终止密码子和长的内部外显子处进行m6A修饰，这在小鼠和人类之间是保守的。所谓的RNA甲基组可能在基因表达的调控中起着重要作用。在大肠杆菌中，Dam甲基酶在DNA水平上引入5'-GATC-3'座的m6A修饰。这使得细胞在错配修复过程中能够区分亲本链和子链。
二、应用类型
WB: 1:1000-1:10000DotBlot ：参考发表文章
IP: 参考发表文章ICC: 1:200
IHC: 参考发表文章IHC-P/FFPE: 1:100
ELISA: sandwich-ELISA
三、发表文章（超200篇）
部分发表文章展示：
1.WB（+3）
HIV-1envelopeproteinsup-regulateN6-methyladenosinelevelsofcellularRNAindependentlyofviralreplication.
TirumuruN,WuL.TheJournalofbiologicalchemistry(2019):.202003WB,DOTBLOT;testedspecies:human
2.Dolt Blot（+63）
N6-methyladenineDNAModificationinGlioblastoma.XieQ,WuTP,GimpleRC,LiZ,PragerBC,WuQ,YuY,WangP,WangY,GorkinDU,ZhangC,etal.
Cell (2018):. 202003DOTBLOT,IP,ICC,IHC-P;testedspecies:humanN6-methyladenineinDNAantagonizesSATB1inearlydevelopment.LiZ,ZhaoS,NelakantiRV,LinK,WuTP,AldermanMH,GuoC,WangP,ZhangM,MinW,JiangZ,etal.
Nature (2020):. 202003DOTBLOT,IP,ICC;testedspecies:mouseIdentificationofaDNAN6-AdenineMethyltransferaseComplexandItsImpactonChromatinOrganization.BehLY,DebelouchinaGT,ClayDM,ThompsonRE,LindbladKA,HuttonER,BrachtJR,SebraRP,MuirTW,LandweberLF
Cell (2019):. 202003DOTBLOT
3.IP（+143）
N6-methyladenineinDNAantagonizesSATB1inearlydevelopment.LiZ,ZhaoS,NelakantiRV,LinK,WuTP,AldermanMH,GuoC,WangP,ZhangM,MinW,JiangZ,etal.
Nature (2020):. 202003IP;testedspecies:mouseDecipheringthe"m6ACode"viaAntibody-IndependentQuantitativeProfiling.Garcia-CamposMA,EdelheitS,TothU,SafraM,ShacharR,ViukovS,WinklerR,NirR,LasmanL,BrandisA,HannaJH,etal.
Cell (2019):. 202003IP;testedspecies:human,mouseR-2HGExhibitsAnti-tumorActivitybyTargetingFTO/m6A/MYC/CEBPASignaling.SuR,DongL,LiC,NachtergaeleS,WunderlichM,QingY,DengX,WangY,WengX,HuC,YuM,etal.
Cell (2018)1721-2:90-105.e23. 202003IP;testedspecies:human
FAQ:应该如何保存SYSY抗体
【1】运输条件
所有抗体和对照蛋白/肽以冻干粉状态（真空冷冻干燥）运输，室温下可以在数周内保持稳定和活性。
【2】如何重组（Reconstitution，溶解）抗体
1.所有抗体均由PBS冻干。用PBS溶解抗体冻干粉，请参照数据手册定量添加去离子水。大容量溶解时，先添加去离子水，然后适量的PBS和蛋白稳定剂（例如BSA）至2%的zui终浓度。添加蛋白稳定剂时请注意，部分抗体已经含有血清白蛋白。
2.制作重悬溶液时请小心打开盖子。添加去离子水后，轻微晃动溶液。为使液体聚集在样品瓶底部，可以使用离心机离心。操作离心机时，可以在50ml离心管中样品瓶下面铺垫废纸，以方便离心后取出。
3.为抑制细 菌生长，可以添加少量的叠氮化物或硫柳汞作为防腐剂。该操作特别适用于分量包装在4℃条件下保存。
4.荧光标记抗体重悬后，添加1：1比例（体积）的甘油至50%zui终浓度，从而降低冰点并在-20℃保持液体状态。
5.可以向不带标记的一抗添加甘油，以避免冻融循环。
6.按照说明保存重悬溶液。
【3】重悬（Reconstitution）后的长期储存
1.不要使用带有自动除霜功能的冷冻柜（无霜冰柜），以避免此类冰柜的除霜循环（反复冻融，以减少霜的形成）。抗体样品瓶应放置在冷冻柜中温度变化zui小的位置，例如冷冻柜的zui内测。
2.分装抗体并保存在冷冻状态下（-20℃至-80℃）。分装量每份zui少10ul，尽可能使用zui小的储存容器。分装量越小，样品浓度则越容易受到蒸发以及容器表面对抗体吸附的影响。容器表面的吸附作用会显著降低蛋白活性。
3.向样品中添加甘油至50%的zui终浓度可以有效降低冰点，在-20℃的条件下也能够保持液体状态，从而有效地避免反复冻融。
【4】不同产品类型的针对性保存建议
1.对照蛋白/肽:储存温度为-20℃至-80℃
2.单克隆抗体：
（1）腹水液和杂交瘤上清液:应保存在-20℃至-80℃条件下。不推荐在4℃环境下长期存储，与血清不同，腹水液可能含有的蛋白酶会降解抗体。
（2）纯化IgG:应保存在-20℃至-80℃条件下。添加蛋白稳定剂，例如BSA，可以增强抗体的长期稳定性。请查阅数据手册以获悉产品是否已经添加蛋白稳定剂。
3.多克隆抗体：
（1）抗血清: 已添加抗 菌剂，可以保存在4℃的条件下，建议保存在-20℃至-80℃。
（2）亲和纯化抗体：稳定性稍弱于抗血清。建议保存在-20℃至-80℃条件下。添加蛋白稳定剂，例如BSA，可以增强抗体的长期稳定性。请查阅数据手册以获悉产品是否已经添加蛋白稳定剂。
4.带荧光标记抗体:与甘油以1：1比例（体积）混合，在-20℃至-80℃条件下以液体状态储存，避免光照。
文章来源：https://www.amyjet.com/featured/m6a-202-003-2.shtml
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