SiR-DNA™活细胞染料：高DNA特异性、低毒性

关于活细胞DNA染色，下面介绍几种方法之间不同的区别，比如细胞毒性、细胞渗透性、特异性，以及超分辨率显微镜兼容性。

市面上几种常见DNA染料对比 

注：SiR-DNA™是Spirochrome SA公司的商标 (瑞士)

Vybrant® DyeCycle™ Ruby stain 和Syto61™是美国Thermo Fisher Scientific公司的商标

DRAQ5™是Biostatus公司商标

Hoechst™是美国Sanofi公司商标

SiR-DNA™的主要发展方向是将荧光特性、高DNA特异性、低毒性与远红外激发/发射范围相结合。此外，由于其稳定性和对远红光的特性，探针在超分辨显微镜（STDE和SIM）中表现非常好。因此，SiR-DNA™是一种优良的探针，其性能与SiR-tubulin和SiR-actin一样优*。

在显微镜观察和高通量筛选过程中，SiR-DNA™可以在不受紫外线刺激的情况下进行简单的核复染。在流式细胞术过程中，SiR-DNA™可以直接用于血液/BM的表型分析和细胞DNA含量分析，而无需红细胞溶解或固定、渗透或RNase处理等步骤。 

说了这么多，您有没有对SiR-DNA™活细胞染料很心动了？作为专业的生命科学解决方案供应商，艾美捷科技为您推荐全球畅销的活细胞DNA染色试剂盒： 

* 试剂盒均内含Verapamil（维拉帕米，戊脉安），一种广谱的外排泵抑制剂。

厂家质检：

常见问题整理：

是否兼容固定细胞？

SiR-DNA™可以与甲醇或PFA固定的细胞一起使用。然而，介质对SiR-DNA™的亮度有很大的影响。当混有PBS或Vectashield®的细胞产生很低的信号，混合有纯甘油的细胞会染出非常明亮的细胞核。因此，我们建议在用SiR-DNA™染色固定细胞时使用纯甘油作为介质。

哪些物种的样本和组织能被SiR探针染色？

下方仅引述已报告起作用的细胞系、组织或生物体。

智人：U2OS，成纤维细胞，HeLa，HUVEC, MCF-10A, HCT-116, A549,红细胞

肌肉：C2C12，IA32，骨骼肌，原代心肌细胞，原代卵母细胞

褐家鼠：初级海马神经元、初级皮质神经元、NRK

风信子：COS-7

金鲫：BHK

黑腹果蝇：Notum上皮，S2

迪德尔菲斯有袋动物：OK细胞

为什么SiR探针的背景比其他荧光团低？

SiR探针使用的是近红外/远红外光谱范围内的激发光，从而避免较短波长的光产生自发荧光，从而避免产生较高的背景。SiR耦合探针具有两种物理状态：①非荧光，关闭状态（spirolactone）和②高荧光，开启状态（zwitterion）。探针与其配体目标的结合有利于高荧光的开放状态，而未结合探针则存在于封闭、非荧光状态（下图）。从未结合态到结合态荧光放大率增加100倍。这就产生了一种高度敏感的生物传感器，其中大部分荧光只发生在结合态。

SiR衍生物在荧光（开放）型（左结构）和非荧光（封闭）型（右结构）之间存在平衡

Nature Communication专属产品文章精彩了解：

G. Lukinavicius et al.,SiR–Hoechst is a far-red DNA stain for live-cell nanoscopy, Nat. Commun. 6:8497 doi: 10.1038/ncomms9497 (2015).

Cytoskeleton公司成立于1993年，专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药*筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。

目前主要的产品有340余种，其产品主要覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒，并且产品线还在不断的扩大中。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药*筛选服务。