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Gaussia荧光素酶：无须ATP，不受ATP影响

作为报告基因，荧光蛋白（如绿色荧光蛋白（GFP）及其变体红色荧光蛋白（RFP）和黄色荧光蛋白（YFP）或者生物荧光素酶（如萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，Fluc）海参荧光素酶（Renilla luciferase，Rluc））已成为研究基因调控、抗*药*活性考察、基因突变分析、生物成像、DNA杂交分析及实时监测肿瘤发生*展情况等生物过程的潜在有效分析工具。

但GFP等荧光蛋白的灵敏性相比于荧光素酶要低很多，而且GFP在细胞内容易累积，使其不适合实时监测。现有的生物荧光素酶中，Fluc发光时需要辅助因子ATP和Mg2+，Rluc虽然不依赖于ATP和Mg2+等辅助因子，但光子产量较低，另外Fluc和Rluc均不能分泌表达，监测酶活性时需要裂解细胞，操作繁琐且不能实现对实验现象的连续观察。
近年，发现的一种来源于海洋桡脚类动物Gaussia princeps的Gaussia 分泌型荧光素酶是体内已知*小的可自然分泌的荧光素酶。因其可分泌、易于监测、灵敏度过、半衰期短、可进行活细胞或生物体实时监测等特性，在研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白定位、小干扰RNA（siRNA）沉默技术、肿瘤模型药*治*评价、监测启动子活性、实时监测肿瘤发生*展情况和高通量药*筛选等中得到广泛应用。通过报告基因载体，Gaussia可用于哺乳动物细胞表达。表达后的Gaussia为单条肽链的单体酶，其分子较小（185aa），且具有分泌性信号肽，因此可通过内质网分泌到细胞外。该荧光素梅催化底物腔肠素的氧化反应并且发光（480nm），该反应无需ATP参与。
与其他荧光素酶相比，使用Gaussia 作为报告基因有更多的优势：
1. 分泌型荧光素酶，可直接取上清检测，无须裂解细胞；
2. 发光强度高，是其它荧光素酶的1千倍；
3. 反应无须ATP，不受ATP影响；
4. 稳定性高，对温度、PH值等耐受性强。

分泌型碱性磷酸酶（secreted alkaline phos-phatase，SEAP）是人胎盘碱性磷酸酶的突变体，*大特点是能由表达细胞分泌到细胞外，检测时可在不破坏细胞的情况下，任意时间点取细胞培养上清液进行重复、动态的检测，常作为荧光素酶检测过程中信号标准化的内参。
GeneCopoeia 提供预制和定制的 GLuc-ON™ 启动子克隆，包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子的报告基因；双报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子报告基因，以SEAP作为信号标准化的内参，可在活细胞中对超过 20,000 种人和 18,000 种小鼠启动子进行实时活性分析。

分泌型双荧光素酶检测试剂盒，货号：LF031
Secrete-Pair™ Dual Luminescence Assay Kit用于检测双报告系统中Gaussia Luciferase (GLuc)和Secreted Alkaline Phosphatase (SEAP)的活性。GLuc和SEAP都是分泌型蛋白��无需裂解细胞就能从培养基中获得实验样本。
分泌型单荧光素酶检测试剂盒，货号：LF061
试剂盒提供两种用于Gluc分析的缓冲液。Buffer GL-S含有稳定剂，弥补了Gluc信号快速衰退的缺点，可用于稳定活性分析。Buffer GL-H适用于检测低表达量的Gluc活性，可以提供更高的灵敏度。
荧光素酶报告基因载体，货号：ZX101

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