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如何提取纯化唾液中的核酸和外泌体?
唾液是由唾液腺分泌液、龈沟液和黏膜渗出液等构成的混合性液体,储存了大量的人类口腔微生物和口腔局部组织及身体其它部位感染微生物和病毒的DNA、RNA和蛋白质多样性的复杂生物学信息。唾液采集具有非侵袭性,有较高的可重复性,**而廉价,因此唾液组学慢慢的引起了人们的重视。随着唾液基因组学、转录组学、蛋白质组学、微生物组学、代谢组学和miRNA等领域的研究进展,唾液检测已是认识和早期诊断某些口腔ji病和全身系统性ji病较为实用和可靠的方法,唾液组学在ji病诊断中尚处于早期研究阶段。
唾液是血液采集的极好的非侵入性替代方法。从唾液中发现的颊上皮细胞和白细胞的人类基因组DNA可用于诊断中的各种应用。唾液DNA可用于检测生物标志物,以诊断ji病,跟踪ji病进展或监测特定治*的效果。唾液DNA也可用于诊断特定类型的感染。从唾液中分离DNA已成为从血液或组织中分离的一种有吸引力的替代方法,这是由于:样品采集是非侵入性的,无需培训就可以由个人采集样品,并且不需要特殊的设备。
收集到唾液样本后如何提取纯化唾液中的核酸和外泌体呢?
唾液DNA提取试剂盒,NGB-RU45400,特点:
1.样品采集无创且无痛;
2.使用简单的离心柱程序快速轻松地处理;
3.分离高质量的基因组DNA;
4.与使用Norgen唾液DNA收集和保存设备收集并保存的唾液样品以及新鲜唾液样品兼容;
5.提取的唾液DNA可与许多下游研究应用程序兼容,包括PCR,Southern印迹分析,测序和微阵列分析。
测试结果:
唾液样品中DNA的高质量和高产率。使用Norgen的唾液DNA分离试剂盒(1-8条带)从250 µL八个不同的新鲜唾液样品中分离出总DNA。每100 µL DNA洗脱液中有10 µL在1.2%琼脂糖凝胶上电泳用以评估。在所有泳道中表现出DNA的高产量和高质量。M:Norgen的FastRunner 1kb DNA Ladder。
唾液样品Real-time PCR的一致性。使用Norgen的唾液DNA分离试剂盒从250uL新鲜唾液样品中分离DNA。使用了来自同一供体的十个样品。从100 uL洗脱液中取出5 uL唾液DNA进行Real-time PCR反应。在相同的Ct条件下,成功地从不同样品中扩增了GAPDH基因,没有任何抑制作用,表明了用于下游应用的唾液DNA的分离一致性和优良品质。
唾液外泌体提取试剂盒,NGB-65300,特点:
1.完整唾液外泌体的纯化和富集;
2.多样化样品输入范围从5 mL到2 mL;
3.适用于Norgen的唾液外泌体收集和保存套件(货号:65400)处理的唾液样本或新鲜的唾液样本;
4.无需费时的超速离心,过滤或特殊注射器;
5.无需沉淀试剂或过夜孵育;
6.无需蛋白酶处理;
7.纯化不含RNA结合蛋白的纯外泌体;
8.可以使用NanoSight®或电子显微镜分析纯化的外泌体,以评估大概的外泌体大小范围和浓度;
9.可以使用Norgen的外泌体RNA纯化试剂盒从纯化的外泌体中分离RNA。
微生物DNA提取试剂盒,NGB-64100,特点:
1.同时分离和检测微生物和宿主细胞的通用方法;
2.适用于新鲜,冷冻或保存在Norgen的拭子(棉签)收集和DNA分离试剂盒或Norgen的粪便拭子收集和保存系统中的拭子收集的样品;
3.快速便捷的离心柱程序;
4.从DNA样品中去除所有PCR抑制剂;
5.为PCR和NGS应用分离高质量的总DNA(微生物组/基因组测序);
6.经过优化后可从拭子收集和DNA分离试剂盒的全部保存体积中分离出来,以实现*大产量。
微生物DNA提取试剂盒 ,NGB-64100,特点:
1.同时分离和检测微生物和宿主细胞的通用方法;
2.适用于新鲜,冷冻或保存在Norgen的拭子(棉签)收集和DNA分离试剂盒或Norgen的粪便拭子收集和保存系统中的拭子收集的样品;
3.快速便捷的离心柱程序;
4.从DNA样品中去除所有PCR抑制剂;
5.为PCR和NGS应用分离高质量的总DNA(微生物组/基因组测序);
6.经过优化后可从拭子收集和DNA分离试剂盒的全部保存体积中分离出来,以实现*大产量。
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