蛋白定量即蛋白质定量,蛋白质定量根据其目的可分为全蛋白质的“总定量法”和特定蛋白质的“个别定量法”。 蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。
为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。
蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科员常涉及的分析内容。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,是经常进行的一项非常重要的工作。蛋白质是一种十分重要的生物大分子,它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了许多具体的因难。
蛋白定量的测试方法有很多种,其中较为常见的有五种,分别是Bradford法、Bradford斑点试验、Coomassie 斑点试验、紫外分光度检测法及BCA法这五种。当然,每种方法适用的情况都有所不同。
蛋白定量ECL高敏试剂盒,货号:K22020
蛋白定量ECL超敏试剂盒,货号:K22030
蛋白定量BCA法试剂盒,货号:KTD3001
蛋白定量Bradford法试剂盒,货号:KTD3002
彩色预染蛋白质Marker (10-180 kDa),货号:BMM3001
Bradford法:
该方法用于大多数蛋白质定量是相当精丨确的,特别是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或溶菌酶等。但是,去污剂的浓度超过0.2%则影响定量结果。如TritonX-100,SDS,NP-40等。
BCA法:
BCA法特点: 1、灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,*小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。 2、测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。 3、 在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。 4、 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。 5.、受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响:EDTA小于10mM。DTT小于1mM巯基乙醇低于1mm。
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