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Elisa生物检测是一种敏感度高，同时特异性强，重复性好的实验检测方法，由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免丨疫学检验的各领域中。
目前市面上的Elisa试剂盒检测原理主要有以下四种：直接法，间接法，夹心法，竞争法。
四种Elisa检测方法由于其检测原理各有优劣：
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优点
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缺点
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直接法
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1.操作简便
2.消除了二抗交叉反应
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1.一抗由于添加标签免丨疫活性降低
2.标记一抗耗时且昂贵
3.没有产生信号放大
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间接法
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1. 一抗的*大免丨疫反应性得以保留
2. 高灵敏度，信号放大
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1. 二级抗体可能发生交叉反应，产生非特异性信号
2. 需要额外的孵育步骤
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夹心法
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1.特异性，灵敏度高
2.适合复杂的样本
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1.检测时间，反应时间增加
2.步骤繁琐
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竞争法
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1. 通过观察预期信号输出中的干扰来测量样本中抗原（或抗体）的浓度。
2. *常用于分析物较小，不能同时跟两种不同的抗体结合。
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1.计算不太直观
2.总体敏感性和特异性较低。
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通常我们在选择所需要的Elisa试剂盒时主要会从以下几个方面进行选择：
Elisa试剂盒选择原则：
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指标
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选项
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样本类型
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人，小鼠，大鼠
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检测指标的类别
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·多表位的大蛋白：夹心ELISA
·小分子：竞争ELISA
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检测需求
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定性或定量
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灵敏度
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低浓度的物质需选择高灵敏度检测方式
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样本体积
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珍贵的样本用少量的体积
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回收率和线性
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·灵敏度
·动态范围
·标准曲线
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检测系统
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比色法，荧光法，发光法
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其他优势
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协议简单，操作方便，实验时间短
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Elisa试剂盒质量到底怎样？检测结果的可信度高不高？
Elisa试剂盒评价标准：
① 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。
② 灵敏度：反应试剂盒的*低检测浓度
③ 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
④ 重复性：板内、板间变异系数
⑤ 回收率：判断实验的准确性和特异性
Elisa试剂盒的标准曲线：
标曲R值是几个9才合格？
实验室应按检测标准（方法）的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准（方法）如无具体的要求，至少使用5个标样（除空白外）建立线性标准曲线，每个点重复测定1-3次，对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不应低于0.98，对于确证方法，相关系数不应低于0.99。
其实，大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准，实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近*高浓度一半（中间浓度）的位置才比较准确，如果线性大于0.999的话，在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。
如果检测的线性不好，可以减少标准的覆盖范围，将标准的浓度调整到待测样品浓度附近，这样结果也是非常准确的。例如，样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线，但线性非常不理想，这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间，作五个标准。
可以检测检测各类���品，饲料，组织及生物液体中真丨菌毒丨素、抗丨生素、食品添加剂以及其他细丨菌蛋白的ELISA试剂盒：
1.抗丨生素类：氨苄青霉素，E4350，样本：血清，尿液，牛奶，组织
检测食品中抗丨生素的残留
样本类型：组织、血清、牛奶、鸡蛋和其他生物样本
真丨菌毒丨素是真丨菌产生的低分子量次级代谢产物2.真丨菌毒丨素：总黄曲霉毒丨素，E4747，样本：酒、酱油、醋、谷物、花生、
配方饲料、食用油
样品类型：玉米、谷物、花生、大米、大豆等。
食品受到生物和环境污染物的污染发生在生产和加工的几个阶段3.食品添加剂： 沙丁胺醇，K4209，样本：猪尿、组织、饲料
样品类型：牛奶、肉类、玉米、谷物、花生、大米、大豆，等。
表达蛋白经过几个纯化步骤后，宿主细胞蛋白仍然可以以较高浓度存在，甚至会与原料药一起纯化和浓缩；样品类型：细胞裂解液、其他生物液
4.宿主细胞蛋白：CHO 宿主细胞蛋白，E4537，样本：细胞裂解液，其他生物液体
5.其他毒丨素：双酚A（BPA），E4722，样本：细胞裂解液，其他生物液体
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