BCA(Bicinchoninic acid)法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。基于双缩脲反应,即在碱性环境下蛋白质将Cu2+还原成Cu+,产生一种紫蓝色复合物,在562nm处有高的吸光值,该反应产物的量与蛋白质浓度成正比。
BCA蛋白浓度测定法实现了蛋白质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。试剂盒中提供的蛋白标准品为用户制作标准曲线提供了便利。
BCA蛋白质定量试剂盒可用于比色皿法检测,也可用于微孔板法检测。前者虽需较大量(100μL)的蛋白样品,但由于其在检测中使用蛋白样品与BCA工作液的比率为1:20(v/v),从而降低干扰物质带来的影响。后者操作简单方便,仅需少量(10-25μL)的蛋白样品。
不过,由于其在检测中使用蛋白样品与BCA工作液的比率为1:8(v/v),某种程度上限制干扰物质的承受浓度以及降低*低检测水平。Abbkine提供三种规格的BCA蛋白质定量试剂盒#KTD3001。
BCA蛋白质定量试剂盒特点:
1)灵敏度高,*小检测蛋白量可达0.2μg,检测浓度下限达到10μg/mL。
2)速度快,比一般的BCA蛋白浓度测定试剂盒显色所用时间短。比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
3)线性范围广,20-2000μg/mL浓度范围内有较好的线性范围。
4)不受大部分样品中的化学物质的影响。
BCA蛋白质定量试剂盒注意事项:
1)使用BCA蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,因此需注意保持定时和定温,以确保精丨确定量。
2)低温或长期保存,若发现BCA试剂A或者试剂B有沉淀发生。请37ºC温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细丨菌污染,则应丢弃,避免对实验结果造成影响。
3)实验操作规范,提高上样量的精丨确度。
4)每次测定都需做相应的标准曲线,因为显色反应与温度和时间的变化有关,精准的蛋白定量宜每次都做标准曲线。
5)为了**和健康,需要穿实验服并戴一次性手套操作。
Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创丨新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药丨物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免丨疫研究用户*喜爱的产品,从免丨疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免丨疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户*喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!
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