补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,活化后具有酶活性、可介导免 疫应答和炎症反应。可被抗原-抗体复合物或微生物所激活,导致病原微生物裂解或被吞噬。可通过三条既独立又交叉的途径被激活,即经典途径、旁路途径和凝集素途径。
高等哺乳动物的补体系统有三条激活途径:经典途径、替代途径以及凝集素途径。在生物的进化过程中,替代途径应是zui早出现的;其次应该是凝集素途径,而经典途径应该出现得zui晚。
补体成分C5(通常缩写为C5)是补体的第五成分,是补体级联的一部分,在炎症和细胞杀伤过程中起重要作用。它在血清中被发现是一种失活的蛋白质,该蛋白质由二硫键连接的α和β多肽链组成,但可以被两种不同的C5转化酶(C4b2b3b或C3bBb3b)中的一种裂解成两种活性肽(C5a和C5b)。一旦裂解,C5**段将作为一种过敏du素,它是通过C5转化酶的裂解从α多肽衍生而来的,可与各种白细胞表面的C5a受体结合并触发免 疫激活。C5b导致下游补体蛋白(C6-C9)在病原体表面形成攻膜复合物(MAC)。C5的突变和缺陷与严重的反复感染有关。
案例分析——Abbexa小鼠补体C5的ELISA试剂盒
以abx153740小鼠补体C5的ELISA试剂盒为例:
小鼠补体C5的ELISA试剂盒是用于体外定量测量血清,血浆和其他生物液中小鼠补体C5浓度的ELISA试剂盒。该测定法对补体C5的检测具有很高的灵敏度和出色的特异性。
小鼠补体C5的ELISA试剂盒检测原理:该试剂盒基于夹心法酶联免 疫吸附测定技术。将抗体预包被到96孔板上。将标准品,测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂,并孵育整个板子。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后,只有含有足够C5的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上的C5含量成正比。在酶标仪中于450nm处以分光光度法测量光密度(OD),由此可计算出C5的浓度。
小鼠补体C5的OD值标曲——厂家验证
文章来源:
补体C5分析——Abbexa小鼠补体C5 ELISA试剂盒
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