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Norgen的microRNA纯化试剂盒提供了一种快速分离纯化的方法从培养的植物细胞或植物组织中提取的小RNA分子(< 200 nt)。
这些小分子rna包括调控RNA分子如microRNA (miRNA)和短干扰RNA(siRNA)，以及tRNA和5S rRNA。小RNA分子由于其自身的特性而经常被研究调节基因表达的能力。
mirna和sirna通常有20-25个核苷酸长，通过与mRNA分子结合并影响其稳定性来调控基因表达翻译。使用Norgen的植物microRNA纯化试剂盒分离小RNA分子可用于与基因调控和功能相关的各种下游应用分析，包括RT-PCR、miRNA测序、northern blotting和微阵列分析。
纯化是基于自旋柱色谱法使用Norgen的专有树脂为基础分离矩阵。Norgen的树脂结合RNA的方式依赖于离子浓度。小RNA分子优先从其他细胞成分中纯化，如不使用酚或氯*的核糖体RNA。
这个过程包括使用两个不同自旋柱:大RNA去除柱和微RNA富集柱列(请参阅第3页的流程图)。简单地说，对感兴趣的细胞或组织进行裂解使用所述裂解缓冲液C，所述裂解液通过所述的过滤柱旋转，且然后将乙醇加入澄清的裂解液中。
然后将裂解液应用于大RNA的去除而较大的RNA分子会与自旋柱中的树脂结合，而较小的RNA分子则会与自旋柱中的树脂结合RNA物种会通过这个通道。然后乙醇被加入到液体中，并将样品应用于microRNA富集柱。小RNA分子会然后与树脂结合，通过一系列的清洗去除杂质提供洗涤液a，然后用洗脱液洗脱小RNA分子，并可在各种应用程序中使用。