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全自动血液分析仪
全自动血液分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,目前随着近几年计算机技术的日新月异的发展,普朗医疗的血细胞分析的技术也从三分群转向五分群,从二维空间进而转向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术,例如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。
1.体积、电导、激光散射法(这是Beckman-Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法,它集三种物理学检测技术于一体,因此在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。并且该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞,然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用,从而使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池(Flowcell)中,其要接受仪器VCS三种技术的检测。
2. 电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术
典型机型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等,其这类仪器不同的检测系统,其主要将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。其共采用如下检测系统:
嗜碱性粒细胞系统:其该系统检测原理与嗜酸性粒细胞相同,因此不同的是其溶血剂只能保留血液中的嗜碱性粒细胞。**、单核、粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)检测系统:其该系统主要采用电阻抗与射频联合检测方式,从而使用作用较温和的溶血剂,对核以及细胞型态影响不大。其在内外电极上存在直流和高频两个发射器。其由于直流电不能达到细胞质及核质,而射频电能透入胞内测量核大小和颗粒多少,因此这两种不同的脉冲信号的个数及高低综合反映了细胞数量、大小(DC)和核及颗粒密度。其由于**细胞、单核细胞以及粒细胞的大小、细胞质含量、核形态与密度均有较大差异,所以可通过扫描得出其比例。
3. 激光散射和细胞化学染色技术
因此在白细胞分类上,仪器采用两个通道进行,其一个为过氧化酶检测通道,而另一个为嗜碱细胞检测通道。
过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,主要用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。在染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性反应,出现细小颗粒或者稀疏样分布的黑色颗粒为弱阳性反应,从而会出现黑色粗大而密集的颗粒为强阳性反应。其过氧化物酶主要存在于粒细胞系和单核细胞系中,各类白细胞对过氧化物酶的反应是这样的:其早期的原始粒细胞为阴性,早幼粒以后的各阶段都含有过氧化物酶,并且随着细胞的成熟过氧化酶含量逐渐增强,中性分叶核粒细胞会出现强阳性反应,嗜酸性粒细胞具有*强的过氧化物酶反应,嗜碱粒细胞不含此酶呈阴性反应。
1)过氧化酶*强阳性的嗜酸性粒细胞;
2)过氧化酶强阳性的嗜中性分叶核粒细胞;
3)体积较大、过氧化酶弱阳性的单核细胞;
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