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通过血液细胞分析仪对血液流1s-1的研究

普朗医疗器械公司科普通过血液细胞分析仪研究，血流流1s-1的重要性已经被越来越多的医院所重视，但目前市场上很少见到真正能做到低切变率1s-1的粘度计。许多医院误信了推销员的夸大其辞，所购仪器不能提供真实、可靠的1s-1数据。在此，有必要向用户提供一些鉴定真伪的方法，以使用户及广大患者避免不必要的经济损失及误诊的发生。
    首先请切记：实测1s-1的流变仪，它的结构设计应符合公认的测粘原理和科学的计算公式，否则，其质量和使用价值都是不可信的粘度（η）=切应力（τ）/ 切变率（r），请注意公式中的切应力（τ），也称剪切应力，切变应力。对于人体切应力来源于心脏的收缩功能；通过体外诊断试剂对于****粘度计，该力来源于液层高度；对于旋转式粘度计，来源于转速。那么好，请计算您即将购买的粘度仪，它的切应力是否达到1s-1时的要求。即粘度一定、切变率设1s-1时，切应力等于粘度值。请检查厂家文件，切应力技术指标是否满足范围。国际血液学标准化委员会要求,切应力范围10~1000mPa。
    例：粘度油12.28mPaS切变率1s-1 ，此时切应力为12.28mPa，如切应力大于该数据则仪器切应力技术指标达不到实测量1s-1的要求。
    其二：在不同切变率下，测试标准油粘度。尤其低切1s-1时检测标准油粘度，低切1s-1时的误差，直接反映了该仪器在1S-1时的参数修正，直接危害患者1s-1粘度的真实性。仪器只有在各个切变率下都能测准标准油，才有可能测准全血粘度。sflhle
    其三；加入本构方程参数的粘度计测粘时，高、中切值高时，低切才高。而血液粘度告诉我们：高切反应红细胞变形性，低切反映红细胞聚集性；大量临床实践也证明：许多低切高的病人高切是正常的。因此，采用本构方程推算1S-1粘度，可造成大量高切正常低切异常的病人漏诊、误诊。
    其四：调整血球压积鉴定法：理论上压积高，全血粘度也会升高。温度37ＯC时，压积每提高5个单位，观察1s-1时的粘度变化。如是真实数据应变化灵敏，重复性好，反之为模拟数据。
    ◆细胞聚集性测定方法及其应用
    红细胞聚集性是血液非牛顿流动性的重要原因之一，它对于低切变率下的流动性有极大的影响。因此，在血液微流变学的血液细胞分析仪研究中，红细胞的聚集性倍受人们重视，其重要性可与红细胞的变形能力相当。
    **节红细胞聚集性的粘度测定法
    一、原理
    由于在低切变率下红细胞会形成为缗钱状的聚集体，这些网状聚集使血液内部出现了立体结构，因而其流动时的阻力增大。换言之，低切变率下的红细胞聚集使血液粘度升高，其升高程度与聚集程度之间呈正相关。这就是粘度测定可以评价红细胞聚集性的基本原理。
    二、方法
    1、低切变率下的血液相对粘度法
    根据*近国际上推荐的方法，低切变率下的血液相对粘度可以评价红细胞聚集指数，即ηrel=ηb /ηp ，其中ηrel为相对粘度，ηb为血液粘度，ηp为血浆粘度。测定*好在37℃下进行，切变率可选1S-1，或与此接近的状况。
    2、血液粘度测定法之二—— 红细胞聚集指数R法
    本方法由加拿大Brooks提出。他认为在一定切变率下血液的表观粘度与能量耗散率有正比关系，存在红细胞聚集体的悬浮液的能耗高于没有聚集体的细胞悬浮液。因此，聚集与无聚集的细胞悬浮液的表观粘度比值，应当能给细胞聚集程度提供一种度量。为此，他提出红细胞聚集指数R，定义为；R= （η/η0）dex /（η/η0）sal 其中。（η/η0）dex为红细胞悬浮于一定分子量的葡聚糖溶液的相对粘度（η0为葡聚糖溶液的粘度），（η/η0）sal为红细胞悬浮于生理盐水—EDTA溶液中的浓度。不言而喻，两种细胞悬浮液的压积应当相同，例如均选定30%的细胞压积。R的数值与若干因素有关，例如葡聚糖的浓度、切变率的高低，Brooks曾做过一系列血液细胞分析仪实验，我们选其中有代表性的一项，在葡聚糖的浓度为1—8g/100mL及切变率为0.27 S-1——107.5S-1范围内，聚集指数R一般呈现先升后降的趋势，并在葡聚糖浓度为3—4g/100mL处出现一个峰值。R值与切变率的关系也很明显，在较低的切变率下，R值较大，这反映了低切变率下红细胞聚集程度较高的事实。在高切变率下R值小于1，这是由于此时已不存在细胞聚集；另外，葡聚糖溶液作为悬浮剂本身要比生理盐水-EDTA粘度大。
    由上可见，为了能评价红细胞聚集程度，我们应该选择那些细胞聚集—解聚共存的条件，也就是较低的切变率与合宜的葡聚糖浓度。例如在1s-1 左右的切变率，以及3g/100ml的葡聚糖浓度。
    （1）准备有关的悬浮剂
    配制生理盐水—EDTA溶液，浓度为0.15mol/L NaCl，5mmol/L NaHCO3及1mmol/L Na2EDTA。配制葡聚糖溶液，浓度为1—8g/100mL，葡聚糖分子量为70000。
    （2）制备两种红细胞悬浮剂
    用离心洗脱血浆的方式，分别制备红细胞的生理盐水—EDTA溶液悬浮液及相应的葡聚糖悬浮液，一般应加悬浮剂离心洗脱三次。*终的红细胞压积可调节至30%。
    （3）测定红细胞悬浮液的表观粘度
    采用旋转式粘度计在低切变率下（例如1s-1）测定两种红细胞悬浮液于37℃（或25℃）下的表观粘度。
    （4）测定两种悬浮剂本身的粘度
    用毛细管粘度计分别测定两种悬浮剂的粘度，测定温度为37℃（或25℃）。
    （5）计算红细胞聚集指数
    根据上述测定结果，用公式计算聚集指数R。
    测定方法与仪器选择
    红细胞聚集性不是一个物理学参量，它同液体的比重、温度等物理量不同，后者不论用什么仪器或装置来衡量，*后都可用一个量纲去描写，并且得到的数值也应相同（实际上由于系统误差等因素的影响，不同方法测出的数值只能相近）。正因为如此，我们才可以用不同的方式去描写红细胞的聚集程度，在粘度法中用比粘度（无量纲），在细胞沉降法中用沉降率（mm/h），在形态学方法中用Lamda，d（Heyn），在光密度法中用透光率，等等。任何一种方法的测定结果对红细胞聚集程度的评价上有其共性，它们之间应当有正相关。
    值得提出的是，要根据实验目的与设备条件两个因素来选用测定方法。如果主要目的是医学临床检验，可能红细胞沉降率*为简易；如果实验需要了解红细胞聚集的全过程，则可能以形态学方法和光密度方法为佳。如果已经购置了旋转式粘度计，而性能上又能进行低切变率（切变率可选1s-1，或与此接近的切变率）的血液粘度测定，则应以粘度法为该实验室的优选测定红细胞聚集法。因为，这样不仅充分发挥了仪器功能，节省了不必要的添置，而且粘度法与血液的流动性联系*密切，直接把红细胞聚集性对血流的影响反映出来。

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