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活体成像试剂 （D-Luciferin and Coelenterazine）
— — 生物化学发光检测法（荧光素酶）
背 景：
活体成像技术（optical in vivo imaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于荧光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化学发光的原理，将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射入体内的底物发生反应，利用光学系统检测光强度，间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域，*常用的有肿瘤或**动物模型的建立，并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
原 理：
常见的荧光素酶有两种，分别是萤火虫荧光素酶（firefly luciferase，编码基因是luc）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，编码基因是Rluc），前者的底物是D-Luciferin，后者的底物是Coelenterazine。它们共同的作用原理是在ATP和荧光素酶的催化作用下，底物被氧化发光（不同底物光的颜色和波长不同），当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。
产 品：
化学发光底物1：D-Luciferin
（1）D-Luciferin, Sodium Salt/ D荧光素钠盐
（2）D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐
（3）D-Luciferin Firefly, free acid/D-萤火虫荧光素,游离酸
化学发光底物2：Coelenterazine
Coelenterazine：普遍认为是天然的腔肠荧光素，是海肾荧光素酶（Rluc）的作用底物，具有许多用途。可用于检测活细胞中钙离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振能量转移）研究，ELISA，HTS，组织或细胞中超氧阴离子和过亚硝酸盐的化学发光检测。
Coelenterazine h: 与Renilla荧光素酶或Gaussia荧光素酶使用具有一定的局限性。体外研究中比其他类似物更适合与钙离子激活发光蛋白共用。据报道，Coelenterazine h的发光强度高于天然腔肠荧光素10-20倍，因此是用来检测钙离子浓度微小变化的有力工具。
Coelenterazine 400a: 是BRET研究中Rluc的优选底物，此腔肠素衍生物在390 nm和400nm之间发蓝色光，对GFP acceptor的光发射干扰*小。
（1）Coelenterazine（天然腔肠荧光素）
（2）Coelenterazine 400 a/腔肠素 400a
（3）Coelenterazine h/ 腔肠素h（from Caliper LifeScience Inc.）