点突变试剂盒/ QuikChange突变试剂盒系列

点突变试剂盒/ QuikChange突变试剂盒系列

轻松实现准确可靠的定点突

当天即可完成的简单实验方案，节省您的时间。QuikChange 突变试剂盒采用了我们独有的、**内即可完成的三步法，可在几乎任何双链质粒模板中引入点突变、氨基酸替换、缺失突变和小插入突变，并且突变效率超过 80%。这种简单的三步法首先使用热循环仪合成突变链，然后使用 Dpn I 降解亲本 DNA 模板，*后通过转化步骤完成实验（图 1）。该方法无需耗时的亚克隆、单链DNA 拯救或体外甲基化步骤。

减少不必要的错误

在 PCR 反应过程中，错误往往随着每轮扩 增循 环 而 逐 步 增 加 ， 与 此 不 同 ，QuikChange 方法采用了线性扩增策略，只能以亲本 DNA 作为模板进行扩增。由于循环次数少而模板起始量相对较高，因此可以确保以*少的错配进行稳定的线性扩增。为了保证只有亲本链被复制，设计了可与亲本链完全匹配的互补引物。使用 Dpn I 酶处理扩增产物，以消化 dam 甲基化和半甲基化的亲本链。这种非 PCR 方法结合市场上保真度*高的聚合酶，几乎可完全消除不需要的**位点突变。

经过优化的试剂确保实验成

QuikChange 试剂盒包含所有必需试剂 (包括对照)，因此您什么都不缺。酶、缓冲液和 dNTP 经过优化，可节省时间并保持结果一致性。此外，我们所有试剂盒都包含 Dpn I 酶和高效的感受态细胞。

引物设计更加容易

QuikChange 引物设计程序可帮助您设计突变引物，以进行 QuikChange 定点突变实验。

• 设计生成适用于点突变、缺失突变和插入突变的引物序列，设定*佳的解链温度和自由能

• 为多位点突变和饱和突变提供建议

• 将导入的 DNA 序列翻译为氨基酸序列

• 支持我们所有 QuikChange 定点突变试剂盒

定点突变领域的**技

QuikChange Lightning 定点突变试剂盒：功能强大的新工具在三小时内即可引入点突变、插入突变或缺失突变，随后便可进行过夜转化，同时保持了 QuikChange 试剂盒预期所能

达到的高准确性和高效率（图 2）。由于采用了我们独有的三步 QuikChange 实验方案及催化速度更快的酶，扩增和筛选步骤所需时间得到了缩短。这些新型酶类仅为我们的 QuikChange Lightning 定点突变试剂盒所独有。

增强的持续合成能力可减少筛选时间

我们的 QuikChange Lightning DNA 聚合酶融合蛋白是**配方，能够以超高的保真度在更短的时间内延伸突变引物。我们的QuikChange Lightning DNA 融合型聚合酶具有增强的持续合成能力，极为准确和高效，并能扩增长片段靶序列，同时大幅减少延伸时间。• QuikChange Lightning DNA 聚合酶融合蛋白具有更快的延伸时间 (30 秒/kb)• Dpn I 限制性内切酶经强化，只需 5分钟即可高效消化亲本质粒 DNA，为您节省多达 55 分钟的时间

适合大片段质粒

使用高保真酶来扩增长片段靶序列非常关键，因为突变频率随扩增子的增大而线性增大。该试剂盒适合富含 G/C 的复杂质粒和/或长达 14 kb 的大片段质粒。我们的新型 QuikChange Lightning 试剂盒包含我们的 QuikSolution 试剂，可促进大片段质粒的复制。

• 我们的 XL-10 Gold® 超级感受态细胞提高了转化过程中 DNA 的转化效率

轻松进行结构域交换

通过结构域交换实验可在相关基因序列之间交换区域，从而绘制同源蛋白质之间的功能差异图谱。按照常规作法，这些实验通常难度大，耗时多，因为实验中要生成含尿嘧啶的 ssDNA1或者依赖方便的限制性酶切位点2。与之相比，使用经过改进的新型QuikChange 试剂盒可快速轻松地进行 DNA 序列3 交换（图 3）。插入与缺失突变的理想之选通过插入与缺失突变研究能够绘制基因的独立功能区图谱、改造载体、引入亲和标签以及纠正移码突变。我们使用QuikChange 方法进行小片段插入和缺失（*多 12 bp），可观察到高于 80% 的突变效率4。公司外部的许多其他研究者使用 QuikChange 方法或其改进方法可以引入 31 bp⁵、87 bp⁶ 和 3 kb⁷ 的缺失或者31 bp⁵ 以及高达约 1 kb⁸ 的插入片段。同结构域交换实验一样，这些 QuikChange试剂盒改良方法简单且高效，可用任何质粒 DNA 模板*大限度地实现多种功能研究。Qcbio公司提供，切勿拷贝。

QuikChange II 定点突变试剂盒：成熟的技术

使用我们 QuikChange II 试剂盒，可以实现高效且准确的定点突变，该试剂盒特点在于包含经由基因工程改造而来，具有增强地纠错功能的 PfuUltra DNA 聚合酶d。

QuikChange II XL：应对条件*具挑战的应用

我们的 QuikChange II XL 定点突变试剂盒a 专为大片段质粒模板或者其它难突变质粒模板的突变而设计。QuikChange II XL试剂盒的特点在于其试剂成分专门设计用于提高 DNA 复制和增强**转化效率。前尘提供，切勿拷贝。

• QuikSolution 试剂可促进大片段质粒复制

• 与原有 QuikChange 试剂盒采用的XL1-Blue® 细胞相比，XL-10 Gold 超级感受态细胞的转化率是前者的5 倍。

QuikChange II-E：实现*高的电穿孔转化效率

我们的 QuikChange II-E 定点突变试剂盒f 专为那些需要将分离的突变克隆转化进电转化感受态细胞的研究者设计。该试剂盒包含我们的XL1-Blue 电转化感受态细胞，该感受态细胞具有四环素抗性并且具有极高的电转化效率。