焦虑性抑郁动物模型及其多层次评价体系的建立（1）

目的：

根据焦虑性抑郁ji病临床多病因特点，采用慢性心理应激联合药wu刺激建立一种焦虑性抑郁动物复合模型；并从动物行为学、血液生化学、组织形态学以及分子生物学等多方面多层次建立该模型的评价体系；采用近灵长类动物树鼩建立一种更接近人类临床的新型焦虑性抑郁动物模型。

方法：

1. 66 只 SD 大鼠随机分为正常对照组、焦虑模型组、抑郁模型组、束缚应激 3 h 组、束缚应激 6 h 组、慢性情绪应激组，分别进行造模。于实验第 14 d、21 d、28 d 造模结束后，采用高架十字迷宫和场景恐惧测试测定大鼠的焦虑样行为，采用旷场测试和强迫游泳实验测定大鼠的抑郁样行为，Elisa 试剂盒检测大鼠脑内单胺递质 5-HT、DA 含量。

2. 120只SD 大鼠随机分为正常对照组、溶媒对照组、焦虑模型组、抑郁模型组、束缚应激 6 h 组、皮质酮 40 mg/kg 组、束缚应激 6 h+皮质酮 20 mg/kg 组、束缚应激 6 h+皮质酮 30 mg/kg 组、束缚应激 6 h+皮质酮 40 mg/kg 组，分别进行造模。采用高架十字迷宫测试、旷场测试、强迫游泳实验测定大鼠的焦虑和抑郁样行为，Elisa 试剂盒检测血浆 CRH、ACTH、CORT 含量，HPLC-ECD 法检测脑内单胺递质含量，HE 染色检测 HPA轴各组织以及脑内海马、杏仁核、前额叶皮质区的病理损伤情况，Western-blotting 法检测脑内神经营养蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表达情况。

3. 12只中缅树鼩随机分为正常组、模型组、药wu组，模型组按照前期建立的焦虑性抑郁造模方法进行造模，药wu组于造模同时给予文拉法辛（6 mg/kg）进行干预，持续21 d。采用自主活动评分、糖水偏好实验、Morris 水迷宫评价树鼩的行为表现，Elisa 试剂盒检测树鼩血浆 CRH、ACTH、COR 含量，HPLC-ECD 法检测树鼩脑内单胺递质含量，HE 染色观察树鼩脑内海马、杏仁核、下丘脑等组织的病理损伤情况。

结果：

1. 优选出束缚应激 6 h（21 d）作为*佳的焦虑性抑郁心理应激模型束缚应激 3 h 组始终未见明显的焦虑和抑郁样行为，脑内 5-HT、DA 含量与对照组比较无差异；CES 组焦虑样行为明显，但在强迫游泳实验中并未表现出抑郁样行为，5-HT、DA 含量相比于对照组大鼠还有上升趋势；束缚应激 6 h 组于造模 14 d开始表现出焦虑和抑郁样行为，到 21 d 时行为表现趋于稳定，同时脑内 5-HT、DA 含量下降较为明显，可作为*佳的焦虑性抑郁心理应激模型。

2. 采用慢性束缚应激 6 h 联合皮质酮 30 mg/kg 的方法建立焦虑性抑郁动物复合模型，并构建该模型的多层次评价体系21 d 束缚应激联合皮质酮 30 mg/kg 组大鼠进入开臂的时间、次数、旷场中自主活动次数均较对照组及抑郁组有显著差异，强迫游泳不动时间较对照组及焦虑组显著增加，焦虑样和抑郁样行为均十分明显；同时，与对照组比较，该模型组大鼠血浆 CRH、ACTH、CORT 含量显著上升，HPA 轴亢进；各脑区单胺递质 5-HT、NE、DA 的含量和神经营养蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表达均明显下降，单胺能系统失衡，神经营养缺失；此外，病理切片发现该模型组大鼠 HPA 轴以及各脑区均存在较为明显的损伤。

3. 采用近灵长类动物树鼩成功建立一种新型的焦虑性抑郁动物模型模型组树鼩自主活动评分、糖水偏食度、学习记忆能力均明显下降，血浆 CRH、ACTH、COR含量较正常组显著上升，脑内单胺递质含量下降，病理损伤明显；给予文拉法辛干预后，模型树鼩的行为表现得到改善，血浆 CRH、COR 含量下降，各脑区5-HT、NE、DA 含量均有一定程度的回升，其中以 5-HT *为显著，符合该药wu提升脑内 5-HT和 NE 浓度的临床**机制，该药wu预见性研究证实焦虑性抑郁树鼩模型建立成功。

结论：

综上，本研究通过优选的心理应激模型联合皮质酮注射，通过多浓度多时间点分析，*终确定 21d 束缚应激 6 h 联合皮质酮 30 mg/kg 能成功建立焦虑性抑郁动物复合模型；在此基础上，从动物行为学、血液生化学、组织形态学以及分子生物学等多方面多层次综合分析，建立了一套系统的该模型评价体系；然后进一步以树鼩为研究对象，建立一种更接近人类临床的新型焦虑性抑郁动物模型。