在动物模型中模拟人类精神和神经发育障碍的各个方面是一项具有挑战性的任务。尽管如此,小鼠已成为一种广泛使用的模型系统,用于研究这些ji病的病理生理学和治liao策略。然而,相应的行为测试往往很复杂,需要丰富的行为测试经验。在这里,我们提出了几个简单的检测方案,即筑巢、巢切碎及大理石掩埋实验,这可以作为具有精神ji病(潜在)特征的小鼠模型的行为表型分析的起点。
筑巢测试
在测试前至少 7 天单独饲养小鼠。确保饲养条件满足共同标准,例如受控照明( 12:12 小时明暗)、温度和湿度以及低噪音水平、丰富的笼子环境以及随意提供食物和水。测试可以在动物的标准住房室中进行,以确保小鼠zui大限度地熟悉它们的环境。
测试前 24 小时,从测试小鼠的笼子中取出任何筑巢材料。
避免任何可能在您的测试结果中引起偏差的设置(例如,在空间上分隔不同的测试组)。
在测试当天(推荐是晚上),为每只测试老鼠提供一个小窝。使用干净的镊子分发巢穴。
通过拍照记录试验开始时的状态。
20 小时后,记录现状(“t20”)。注意不要打乱巢穴 。因此,避免动物的任何激动。因此,要拍照,请等到老鼠稳稳地坐在巢穴中(确保巢穴清晰可见)或自愿离开巢穴。不要强行将老鼠从巢中脱臼。确保记录测试动物的识别信息(例如,通过在描绘巢穴之前描绘包括鼠标 ID 在内的笼子标签)。
48 小时后,通过将测试小鼠移动到干净的笼子来结束试验。记录完成的筑巢情况并避免使其混乱。
在测试前至少 7 天单独饲养小鼠。确保饲养条件满足共同标准,例如受控照明(在我们的案例中为 12:12 小时明暗)、温度和湿度以及低噪音水平、丰富的笼子环境以及随意提供食物和水。
测试前 24 小时,从测试小鼠的笼子中取出任何用于筑巢和环境富集的材料。
在测试当天,将测试动物转移到测试区域。确保动物习惯于它们的环境以避免分心,例如不熟悉的气味。这可以通过在房间的一个单独空间中进行测试来实现,老鼠所在的房间就在其中。或者,在测试前的几天让小鼠习惯于测试区域,每天至少 1 小时。
从测试动物的笼子中取出食物和水,并用表面光滑的透明物体代替盖子,例如(玻璃或有机玻璃)板,以防止老鼠在测试期间攀爬。
用镊子取一个小窝,称重并将其放入试验动物的笼子中。
通过在试验开始时拍照来确保文件。或者,可以使用自动视频系统(例如,VisuTrack、SuperMaze 或类似系统)。确保记录测试动物的识别信息(例如,通过在描绘巢穴之前描绘包括鼠标 ID 在内的笼子标签)。
启动计时器。在 30 分钟的观察期间,与测试区域保持至少 1m 的距离。
30 分钟后,停止试验并轻轻将试验动物从笼子中取出。确保所有的巢材料都留在笼子里。
使用相机记录试验结束后的状态(图 1)。
取出燕窝并称重。如果燕窝被撕成几块,请使用zui大的一块。不要包括在移除巢穴过程中脱落的碎片,但不要故意试图甩掉松散的材料。
将 Nestlet 存放在塑料袋中以备文件使用。不要忘记用鼠标 ID 标记袋子。
按顺序测试动物时,在治liao组之间交替进行以避免分析中的偏差。
大理石掩埋实验
动物在实验前至少适应测试室 1 小时。为了隔离外部因素,所有实验均在 130 × 80 × 80 cm 带门的木箱内进行。6 毫米的高压层压墙内衬有隔音泡沫,以减少外部噪音的渗透。测试是在一个 26.6 × 42.5 × 18.5 cm 的笼子(Eurostand 1291H-type III H)中进行的,笼子放在一个高架的 10 毫米磨砂有机玻璃架子上。使用白色 LED 灯条从顶部和底部均匀照亮该设备,并使用 4.4-11 mm/F1.6ens (KOWA) 的高架相机以每秒 25 帧的速度记录。
测试笼中装有用于菌株 1-2 的木屑垫料和用于菌株 3 的玉米芯垫料,高度约为 4 厘米。下一个,20颗蓝色玻璃弹珠均匀地分布在床上四排。在将动物放入笼子后立即开始录制,使用定制的盆景脚本。让动物探索该装置 30 分钟,然后将小鼠移出并拍摄自上而下的弹珠图像。丢弃垫料,并在每次实验之间用 70% 乙醇清洁笼子。
动物行为分析软件:
1、VisuTrack软件
2、SuperMaze软件
3、FishTrack斑马鱼分析软件
动物行为仪器:
1、自身给药、条件恐惧、斯金纳、震惊反射(PPI)、跑步机、各类经典迷宫等
2、动物抓挠分析仪、动物震颤行为分析仪、动物捕食行为分析仪
3、动物主动步态分析、动物被动步态分析、动物自由步态分析(内测中)
4、睡眠剥夺仪、体温维持仪、智能热板仪、转棒疲劳仪、鼠尾光照测痛仪等
神经电生理:
1、光遗传、无线光遗传
2、光纤记录系统(单通道、多通道)
3、电生理信号采集系统(脑电、肌电等)
沪公网安备 31011202007432号