Morris水迷宫实验结果受到很多因素影响,今天特别写篇文章作一个总结,供大家参考:
1、动物品系
不同的小鼠品系在 MWM 测试期间的性能差异很大。
2、设备装置
很多市售的Morris水迷宫尺寸不规范,材质比较老套,比如还有很多厂家在使用不锈钢材质,不锈钢焊接而成的水迷宫水池通常具有突出的焊缝、波纹表面或其他提供近端提示的特征,这样的线索破坏了水迷宫测试的目标,因为实验目的就是测试动物使用远端线索导航的能力。光滑的内墙、温和的材质感还可以*大限度地减少动物在早期试验中爬墙的尝试,因此,建议使用保温系数更好的ABS工程材料的水迷宫水池。
莫里斯本人*初的迷宫直径为 130 厘米,但后来他引入了一个更大的直径为 214 厘米的迷宫。此后,他又提到了一个 200 厘米直径的迷宫。在这里,我们将描述两种装置:一种用于大鼠,一种用于小鼠。构成评估空间学习的*佳任务的下限规格,目前比较主流和规范的水迷宫水池直径(内径),应当保持大鼠在160cm以上,小鼠在120cm以上。值得注意的是,很多厂家生产的大鼠水迷宫水池大鼠的直径只有150cm,其实对大鼠水迷宫实验有深刻的影响。
*常见的问题是使用不合适的水池与平台尺寸组合。许多水池偏小或处于构成评估空间学习的*佳任务的下限。较小的水箱允许动物使用其他策略(例如从墙壁游泳固定距离)来解决任务,同时尽量减少远端线索的使用。不幸的是,如果水池太小,动物会学习,实验者不会意识到动物正在使用非远端线索来寻找平台,并且不会出现任何问题。*终,实验结果统计时就会发现实验差异不明显,实验动物虽然学得很快,但几乎没有学习曲线,失去实验意义。因此,从一开始就选择合适的水箱尺寸是获得有效空间学习的*佳方法。下图为国外同行测试的结果参考图:
3、逃生站台、平台
平台可以是方形或圆形,直径通常为 10 或 11 cm或 10-12 cm,通常浸没在表面以下 1-2 cm,对于小鼠来说,这个深度通常会减小到0.5-1 厘米。需要注意的是,在某些学习阶段使用较小的平台尺寸来增加任务难度是有益的。任务难度是搜索区域与目标大小之比的一个“函数”。
平台通常由丙烯酸或 PVC 制成,底座通常是一块较大的丙烯酸树脂,位于水池的底部,并且足够大以提供稳定性,这样当动物爬上它时它就不会倾斜,当动物撞到它时它会抵抗运动。
4、水温
另一个常见的问题是水温。*初建议大鼠需要比大多数实验室发现的典型环境空气温度(19-22°C)更温暖的水,但这尚未得到广泛证实。在已平衡至 19–22 °C 环境温度的水中进行测试的大鼠表现良好,并且在典型测试年龄时没有显示出明显疲劳或体温过低的迹象。然而,小鼠的情况可能会有所不同。
5、房间配置
Morris水迷宫应放置在具有充足周围视觉线索的房间中,同时在测试期间不要移动这些提示线索。线索与迷宫外墙的距离也很重要,一些实验室相对杂乱,在迷宫周围安装窗帘很有用。窗帘不需要完全闭光。
6、灯光
房间照明应该是间接的,不要直射,特别是如果使用摄像机、计算机和跟踪软件来记录性能。跟踪软件对水面的光反射很敏感,这些反射通过间接照明被*小化。
7、实验员
实验者可以:(a) 在测试期间离开房间;(b) 站在视觉障碍后面;(c) 在固定位置保持静止。后者是*常见的,但不应忘记实验者随后成为远端线索之一。在不同象限中进行测试的动物,尤其是在迷宫的远端和近端一半,有时会显示出不同的潜伏期,这取决于它们是游向还是远离实验者。不应让实验者在等待动物执行任务时四处走动而混淆结果。
8、跟踪系统
有许多商业供应商提供可用于 MWM 的跟踪系统。非详尽列表包括上海欣软VisuTrack、HVS Image、Accuscan、Columbus Instruments、Watermaze Software等。与任何软件系统一样,在选择之前应进行现场测试。
9、测试顺序、测试次数
水迷宫实验测试次数通常为每天4次,几乎没有证据表明每天的试验次数会产生较大的敏感性差异。
测试顺序有2种,也是经常有老师咨询我们的。**种方法就是每只老鼠先完成当天的4次测试,再开始下一只老鼠的测试;另一种方法就是让一只动物一个trai结束,在平台上停留 15 秒,然后将其移至笼子并直接开始测试**只动物并重复此轮换,直到所有动物完成试验trial 1,然后重复该过程以进行后续试验,trial2、trial3及trail4。后一种方法提高了小鼠的学习能力,但并没有可比的数据用于大鼠。
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