大小鼠跳台实验方法
(step down test)
一.实验原理
在一个开阔的空间,动物大部分时间都在边缘与角落里活动。在方形空间中心设置一个高的平台,底部铺以铜栅,铜栅通电。当把动物放在平台上时,它几乎立即跳下平台,并向四周进行探索。如果动物跳下平台时受到电击,其正常反应是跳回平台以躲避伤害性刺激。多数动物可能再次或多次跳至铜栅上,受到电击后又迅速跳回平台。多次训练后,动物形成记忆而不跳下站台。**或者其他因素(如脑损伤)的改变会增强或者削弱这种记忆保存时间。
二.实验装置
跳台箱材质采用无味的ABS塑料材质或者医用有机板,颜色为黑色或者灰色。上海欣软信息科技有限公司生产的跳台箱包括一个30cm*30cm,底部可通电的实验箱、一个直径为5cm/10cm 的平台以及SuperSdt跳台视频分析软件,通常平台高度与直径一样,尺寸可定制。实验箱上方安装录像监控器(视频盒),以录制动物在实验箱中的活动情况,以供日后分析使用。
三.实验方法
1. 在实验前一个星期,每天抚摸实验动物1-5min,连续7天,(这个时间段需要实验员根据实际情况来定制)借以消除实验动物对实验者的恐惧。
2. 训练期:训练时将动物放入跳台箱内适应3-5min,然后底部**通交流电,动物受到电击,正常反应是跳上平台躲避伤害性刺激。训练期内如果该动物未跳下平台则弃去不用。
3. 试验期:训练后根据具体实验目的, 在一定期间(一般24h)将动物再次放在平台上,观察3-5min,记录动物**次从平台跳下所需的时间,即跳台潜伏期(step down latency,SDL)和观察期内跳下平台的次数,即错误次数(error times,ET),若观察期内动物未跳下平台,ET记为0,SDL记为观察时间(3-5min)。
四.实验数据
主要应用的实验数据:
1.观察时间,动物在实验箱中活动的总时间
2.潜伏期,实验开始后动物**次从平台上跳下的时间
3.错误次数,整个观察期内动物一共从平台上“成功跳下”来的次数,“成功跳下”的行为需要满足SuperSdt软件中定义的刺激延迟时间阈值
4.**区总时间,动物停留在平台上的时间
5.刺激区总时间,动物在电击区域的时间,也称为错误时间
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其中潜伏期和错误次数指标作为评价学习记忆能力的重要指标,通常这两个指标高度相关。
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五.注意事项
1. 为了提高动物成功躲避电击跳上平台行为,通常在测试前先将动物放在实验箱中适应5min后再放入迷宫。
2. 实验前一周每天抚摸大鼠可以明显减少大鼠对实验者的恐惧感以及无关刺激对实验箱中动物的影响。
3. 尽管还没有证据证实在**中不同时间对于实验结果是否有明显的影响。但是结合实验的数据建议实验动物检测时间*好在上午9:00至下午15:00之间进行,如果有条件,且需要重复多次检测,尽量在每天同一时间段检测,以减少数据的波动。
4. 如果实验中尤其是训练期时,实验动物一直不成功跳上平台或者跳上平台后不再跳下来,都应当考虑剔除。
5. 对于实验中出现的动物一半身体在平台上,一半身体去触碰电栅栏区域,虽然是小概率,也应当考虑剔除数据或者修改平台尺寸(通常是平台高度与实验动物身长不匹配)。
6. 动物的回避性反应差异较大,因此需要检测大量的动物。如需减少差异或少用动物,可对动物进行预选或按学习成绩好坏分档次进行试验。
7. 电流刺激大小需要根据每批次动物的应激情况来调节,通常小鼠刺激大小为0.2-0.5ma,大鼠为0.6-0.9ma左右。
8. 隔音箱的作用是*大限度的降低外界噪音、光线以及人为因素对实验本身的干扰,隔音箱属于选配组件,情况允许下建议配置。