新生期大鼠母爱剥夺对成年后自发活动的影响

生命早期应激(Early life stress，ELS)是多种精神**的重要风险因素，可诱发重性抑郁症、创伤后应激障碍、儿童注意缺陷症及精神分裂症等⋯。精神**的遗传因素、生命早期环境因素和成年后环境因素-2J 2强调了生命早期环境因素在精神**发病中的作用。建立ELS对成年后行为影响的动物模型，可为进一步研究ELS的神经生物学机制提供研究平台。本实验以新生期母婴分离-3J作为母爱剥夺的手段，观察生命早期母爱剥夺对大鼠成年后自发活动的影响，并在大鼠成年后再次接受慢性应激，观察应激对自发活动（旷场实验）的影响，从而建立“母爱剥夺对成年后行为影响” 的动物模型。

1 材料与方法

1．1 实验动物分组

3月龄雌雄sD大鼠(中山大学医学院实验动物中心提供)体质量200～280 g，在光／暗周期为12}l／12 h、光照时间7：00～19：0o的条件下饲养(自由摄食和饮水)，1周后分笼(每笼1只雄鼠，2只雌鼠)，待雌鼠怀孕后单笼饲养。生产后，每笼饲养10-12只新生大鼠和1只哺乳期母鼠。将仔鼠分为母爱剥夺(MD)组和对照组(N)，MD组在出生后第2～21 d每天母婴分离1 h[将母鼠拎出放入一笼中，然后将新生大鼠放入另一笼，并入温育箱(32．0±0．5)qC]。1 h后将新生大鼠送回*初笼中与母鼠团聚。N组不做任何处理。MD组在出生4周后单笼饲养，N组每4只一笼正常饲养-4J。

1．2 大鼠自发行为的测定

采用SuperMaze动物行为分析系统(上海欣软信息科技有限公司，中国)记录并分析大鼠的自发活动。大鼠自主行为的检测固定在15：0o～17：00进行，检测时间5 min。自发活动在开放场(40 cm×40cm×35cm)进行，并由红外摄像系统和视频合成器记录大鼠活动；计算机分析系统分析大鼠运动轨迹。监视及分析下列行为改变：休息及活动时间、总路程、运动线性度、速度、中央区活动时间路

程、四周(四角和四边)活动时间及路程，并以上述指标来判断大鼠的行为改变。新生期大鼠母爱剥夺对成年后自发活动的影响

1．3 慢性应激

大鼠满2月龄后连续接受10 d慢性应激，1次／d接受空瓶应激(4h)、昼夜颠倒、45℃热刺激(10min)、夹尾(5 min)、水平摇晃(45次／min，5 min)中的1种，每种限用2次。

1．4 统计学处理

实验结果用EXCEL和SPSS1 1．0统计软件进行分析，结果以 ±s表示，数据分析用配对t检验和独立样本t检验。

2 结果

2．1 新生期母爱剥夺对成年后自发活动的影响新生大鼠母婴分离后正常饲养。分别在2月龄和3月龄时检测大鼠的自发活动：MD组2月龄时，自发活动总路程、‘休息时间、中央路程以及周边路程等与N组比均无统计学意义(图I)；3月龄时，MD组活动总路程与N组比显著减少(P<0．05)；虽然休息时间延长、中央路程和周边路程缩短，但均无统计学意义(图2)。结果表明新生期母爱剥夺的大鼠随着鼠龄的增长，逐渐出现自发活动的抑制现象。2．2 慢性应激对成年后的母爱剥夺大鼠自发活动的影响两组在2月龄后接受10 d慢性应激，以开场试验。结果显示(表1)，两组活动总路程显著减少(P<0．001)、休息时间均大幅度延长(P<0．001)、中央路程显著减少(P<0．01)。MD组应激与N组比，总路程大幅度减少(P<0．001)、休息时间大幅度延长(P<0．01)、中央路程大幅度减少(P<0．01)。结果表明：慢性应激可显著抑制大鼠自发活动，而生命早期的母爱剥夺加重了慢性应激对自发活动的抑制作用。新生期大鼠母爱剥夺对成年后自发活动的影响

3 讨论

早期应激可影响成年后学习记忆、性格特征和情绪能力等，对适应社会、工作、学习产生重大影响，甚至增加精神障碍的发病率或犯罪率。近几年对其生物学机制的研究虽有增加，但由于临床研究的局限性和研究周期长等原因，对其机制仍知之甚少。而动物实验可为ELS提供便利，建立稳定可靠和易于检测的动物模型，可以为研究ELS所致成年后行为改变及其神经、***和**等生物学研究提供研究平台。目前已有的生命早期应激模型主要有雌性动物孕期(胎儿)应激和新生动物应激。母爱剥夺是人类生命早期的严重生活事件之一，对成年后的身心健康产生影响。因此，建立母爱剥夺动物模型，能更好地模拟人类ELS，为探讨其生物学改变提供研究工具。

本实验对新生大鼠施行母爱剥夺1 h／d，在其成年早期(2月龄)未出现自发活动障碍，当鼠龄增至3月龄时，其自发活动的总路程显著减少，活动时间缩短，表明生命早期母爱剥夺可造成成年后行为异常。慢性应激是人类抑郁症的重要诱发因素之一．

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