条件性恐惧实验测试方案

条件性恐惧实验测试方案
模型的制备：将大鼠放在动物饲养室内适应一周。饲养室内温度为24±0.5℃，湿度为60%，光：暗周期为12h：12h（光照时间为8：00-20：00），随机分笼单独饲养，自由进食、饮水。

A．条件性恐惧的建立：将大鼠分别放入斯金纳箱（箱子底部为铜条栅栏，可通电）内,适应2分钟后再给予单一频率声音信号(4.5KHZ,60dB,30S，该声音由美国Adobe公司的Adobe Audition2.0软件制作)适应4次（两次声音间隔1-4分钟）,然后再给予6次以声音信号为提示的不可逃避足底电击(1mA,5s)，声音与电击同时结束，两次声音间隔为1-4分钟，共28分钟。动物在被电击时发生惊叫、惊跳、逃避等,听到声音提示时出现慌张、逃避或者僵立行为（除呼吸外无其他运动行为），这样建成恐惧动物模型（以下简称建模）。实验结束后让动物在斯金纳箱内继续停留2分钟后放回饲养笼饲养。每次实验结束后用90%酒精擦拭箱底，用湿布擦拭箱壁，以避免残留气味对后续实验大鼠的影响。

B．恐惧消退训练：24h后将已经建立条件性恐惧的动物再次放入斯金纳箱内，仅给予声音信号16次，两次声音间隔为1-2分钟，共24分钟。恐惧对照组在对应的时间点放进斯金纳箱内24分钟，不进行消退训练（不给声音刺激）。

C．条件性恐惧消退保持测试：恐惧对照组和恐惧消退组（注：此时大鼠分为两组：恐惧消退组和对照组）分别在恐惧消退训练后的第1、3、7天将大鼠放在训练箱内，给予5次声音信号，时间间隔为0.5s，记录3分钟内的不僵立时间，计算3分钟内不僵立时间百分比，作为消退保持成绩。百分比越高，表明消退保持成绩越好。

需要记录的实验测试指标：

附：XR-XC404型恐惧记忆实验系统

 场景恐惧实验控制器支持程控输出，即通过软件控制刺激信号的输出，同时，还支持手动输出，方便用户开展其他相关实验

 场景恐惧实验刺激器同时支持正弦波恒流电刺激与双极性直流脉冲恒流电刺激的输出，这2种刺激方式在很多国外文献上有明确规定

 电刺激均为9电极扰频（交替）输出，可有效避免实验动物“刺激盲区”与电栅栏短路

 标配隔音箱，隔音箱采用高分子密度板制作，带有通风装置

 恐惧实验箱尺寸可根据具体实验**定制

 恐惧实验箱底部配有黑白2种可拖拉屎尿托盘，设计人性化

 恐惧实验装置可以选配光刺激模块，增加实验的条件刺激方式