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PhD高压均质机应用于细胞破碎-生物工程
PhD高压均质机的原理:
由电源(220V/380V, 60/50 Hz) 驱动PhD高压均质机的泵柱塞做往复运动,物料在柱塞作用下,进入可调节压力大小的阀组中,经过特定宽度的限流缝隙(均质区),瞬间失压的物料以极高的流速(1000-1500米/秒)喷出,在均质阀内产生至少三种效应:空穴效应、撞击效应、剪切效应。经过这多种力学效应相互作用处理过后,细胞破碎率大于99%.
生物类 适用案例:
酶工程 , 人用疫苗, 兽用疫苗, HPV疫苗, 融合蛋白, 核酸, 胰岛素, 试剂,抗体等。
众多的生物制品厂、药厂、高校、科研院研究所,将大肠杆菌、酵母菌,或海洋澡类细胞等,放入PhD高压均质机,加压至1500-2000bar,将细胞壁进行破壁,提取细胞内的蛋白、酶类等有效成份,制成疫苗、试剂、抗体 等,已带来可观的收益。
细胞破碎(cellrupture)技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎技术是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。随着重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。
高压均质破碎法(homogenization):在欧美、中国、日本、韩国等多个国家,高压均质机是常用的细胞破碎设备。美国PhD高压均质机,其结构由电机驱动泵体,进而在均质阀体内生成压力。细胞浆液通过止回阀进入均质阀体内,在高压下迫使其在均质阀的小孔中高速冲出,且由于瞬间减压和高速冲击,使细胞同时受到高的液相剪切效用、空穴效用、撞击效用而破碎。在操作方式上,可以采用单次通过高压均质机或多次循环通过等方式,也可连续操作。为了控制温度的升高,PhD同时采用内置式冷却和外部冷却的方式,使出料最低温度能控制在0-10℃左右。在工业规模的细胞破碎中,对于大肠杆菌,用美国PhD高压均质机,在15,000psi(1,035bar),均质一次即可达用用户要求;对于酵母等难破碎的及浓度高或处于生长静止期的细胞,常采用均质压力在25,000psi(1,720bar)的情况下均质。
生物类 适用案例: 酶工程 , 人用疫苗, 兽用疫苗, HPV疫苗, 融合蛋白, 核酸, 胰岛素, 试剂,抗体等
表达载体:
大肠杆菌 , 酵母菌, 动物细胞, 结核杆菌, 芽孢杆菌, 嗜热杆菌 等
应用特点:
通过菌种转基因的方式表达蛋白或核酸等物质,经过破碎细胞壁,离心纯化的手段得到最终的产品,一般工艺流程为:
DNA转接→菌种培养→获得湿菌体→缓冲液重悬→破碎细胞壁→离心→纯化
应用优势:
温度控制:-10-30℃冷媒介质+PhD控温均质阀+无菌换热器
温度范围:-5-70℃ (通常控温在4-10℃内)
材质:SS316L卫生级不锈钢,无菌接口设计,直管式换热器无死角
破碎压力 :PhD高压均质机,适用所有生物学菌体的破碎.
实验型均质机,到生产型设备,最大压力均可达2750bar,适合研发→生产的同步放大。
细胞破碎效果图:
案例视频:
PhD高压均质机-690bar破碎细胞发酵液-温度4.3度,
破碎率达到99%