脂质体实验中的若干问题解答（二）

六. 做脂质体时,磷脂辅料如何选择?
  1. 如DSPC，DOPE这些磷脂
     仿制药没得说，跟RLD一致即可。对于新药，这个就需要根据药物分子结构、给药途径、药物释放要求等来确定，没有统一的公式！建议反复实验，copy其他药物脂质体的处方不见得奏效，需要调整修改.

  2. 有人用过磷脂酰丝氨酸（PS）做脂质体吗？磷脂酰丝氨酸是在哪里买的？
         NOF、NFC、Lipoid、Cordenpharma和Avantipolarlipids都有卖的，但PS超贵！如果必须用， 最好还是自己合成吧
  3. 那大家除了用PC 经常用的磷脂还有什么呢？
      用PS是代替PC的吗？和PC相比有什么好处？
      PS跟PC还是不一样的，可能是PS带电荷，且一些肿瘤细胞有PS受体表达，PS脂质体靶向性可能更好吧。就是PS太贵，目前大多限于研究，还没有PS脂质体上市.
 

七. 包裹水溶性 药物和脂溶性 药物的区别是？

脂质体可用于水溶性 药物与脂溶性 药物的包裹，其中水溶性 药物是包裹在脂质体的内水相中，通常载药量极低，且容易渗漏在外水相中，水溶性 药物采用pH梯度法包裹率较高，如上市的阿霉素脂质体，其液体长期储存也不会有渗漏，而用常规法制备的水溶性 药物脂质体包裹很低，故水溶性 药物一般不宜做成脂质体；脂溶性 药物是包裹在脂质体的双分子层中，根据相似相容原理进行包裹的，但也存在析出的可能，故一般制备成冻干脂质体，可长期储存。 

八. 脂质体的存储条件：脂质体一般2-8 oC冷藏，脂质体注射液或冻干粉。

九．脂质体的稳定性控制：

        利用PhD高压均质机，先均质完，再用NanoAble-150过滤挤出器，进行挤出，稳定性比较好，空白脂质体，4oC下储存40多天了，无沉淀.

十. 脂质体处方设计：须有的放矢.可从如下方面考虑：

     1. 看看是脂溶性还是水溶性，规格如何

     2.  靶组织是静脉、眼睛还是肺部给药; 

     3.  释放特性要求（半衰期、释药机制）等等，

  如果这些清楚了，基础处方就可以设计出来.

十一、包封率的测定：

1. 葡聚糖G-25和G-50填好的柱子的孔径是多少？

    G-50可以分出100nm的脂质体没有问题。

       不同粒径，可能包封率不同。应该一步到位，做到目标粒径。

 
2. 请问脂溶性 药物做脂质体用离心法分离的话怎么可以知道分离的效果呢？
    可以用G-50柱子看看分离效果，最简单，没有仪器的要求，快速分成两条带那就说明还有没有包封的。
    脂质体如果做得好，脂溶性或水溶性 药物的包封率应该要接近100%，是不需要分离未包封药物的。 处方、工艺和设备都需要科学设计.
 

 3. pH梯度法载药的时候，脂质体、药物、调节pH的缓冲液，这三者加入顺序有要求吗？
   脂质体，加入pH调节缓冲液，相同温度下，再加入药物溶液。一般情况下是这个顺序。
   要注意控制搅拌速度或不搅拌，避免高温下脂质体粒径增大.
   以前用过震荡，发现会沉淀.絮状沉淀的原因是局部某一组份过量了，严重的话是不可逆的
   答：快速混合后，马上静止，在60度～65度环境下，15分钟以上沉淀会消失的,
   这么少的量，不用额外处理，加入即可，保证两者温度一致.
 
 4. 包药结束后，温度降下来后还产生沉淀怎么办？
    包药结束后，温度降下来还沉淀，说明药没有包进去, 是不是建立的pH梯度有问题呀?
 答：空白脂质体和药物溶液的体积，最好控制在1:2以内; pH梯度最少要2.5以上； 

     药物浓度可以做到10mg/mL,这样药物溶液体积对载药后脂质体终体积影响要尽可能小.

十二．PhD 高压均质机/过滤挤出器的应用： 

美国 PhD 高压均质机在制药领域中常用于均质纳米乳剂、纳米粒、脂质体等，制备工艺一般为先进行初乳制备，再经高压均质得到较小粒径和均匀一致的制剂。
       美国 PhD高压均质机的可控设备参数有均质压力、循环次数（循环时间）和温度等，制剂粒子大小和分布一般随着均质压力增大，和循环次数增多明显下降，到达一定压力和循环次数后渐趋平衡；在制备脂肪乳时需选择合适的均质温度。由于高压均质过程对不同制剂性能的影响各异，因此不同处方和剂型的纳米制剂应对均质参数进行优化，以确定最佳工艺。
   美国 PhD高压均质机因其均质效率高和工艺稳定等优点，在纳米制剂的制备中被日益广泛使用。该法最显著的优势是制得的粒子粒径小和粒度分布窄且均匀，效果显著，但对制剂的其他质量指标如包封率、载药量、释药速度和稳定性等而言，需结合其他各处方和工艺因素的优化以获得良好的制剂理化性能，因此还需深入研究以获得成熟工艺。尽管如此，高压均质机依然是纳米制剂工业化可采用的最有前途的工艺设备，应用前景广阔。
 

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关键词： 脂质体，pH梯度法载药，包封率测定，磷脂辅料，薄膜分散，脂质体靶向给药，高压均质机，过滤挤出器