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超声波细胞破碎仪的常见问题及解决办法(二)
超声波细胞破碎仪的常见问题及解决办法(二)
3.变幅杆位置摆放也要注意,听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。在破碎时试着加大体积,强度*好不要超过60%.
4.尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说,你的方法很难散热,导致蛋白变性产生气泡,*好停顿时间稍长一些,这种情况多见于包涵体形式的蛋白。
链霉菌(放线菌)超声破碎(超声波细胞破碎仪)的,用的方法条件是什么?
前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。
使用超声破碎时采用的具体条件是:
(1)取**的24h培养液于5000r/min下离心5min收集菌体.
(2)用pH7.5的Na2HPO-NaH2PO缓冲液洗涤3次,再用该缓冲液将菌体配成1:3的菌悬液.置于40
mL大塑料试管内.
(3)(超声波细胞破碎仪)将大塑料试管置于冰浴中,采用超声波破碎(功率200W,1/2”探头,破碎30s,间歇30S).
(4)破碎液于12000r/min下高速冷冻离心30min,收集细胞碎片和上清夜。
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