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仪器科普|SUTTER P1000程序调试


根据前文介绍,初步拉制出一根玻璃电极后,就要根据其**形状及具体要求进一步精细调整参数以满足需求。

P1000调整的原理与P97相同,下图再次贴出供参考。


用于显微注射、胞内记录等的电极较为细长,通常会单步拉制,其PULL和VEL参数的值一般比较大,可以用上图直接调整。而用于膜片钳的电极相对比较短粗,一般选择多步拉制,此时参数的调整方法#会略有不同。

主要介绍一下用于膜片钳的电极拉制技巧

这种电极一般会由3至5步进行拉制,步数越多,电极颈部越短,**也相对更粗,阻抗变小,需要根据具体情况来选择。此时我们会用VEL这项参数来控制具体的拉制步数,VEL通常会在20左右,根据铂金片、拉制仪及玻璃管体质不同也会略有变化,而PULL在这里会选择0

以4步拉制进行举例说明,Heat值通过Ramp测试进行确定,TIME(或DELAY)和PRESSURE暂按照CookBook中的推荐参数保持不变(详见上篇仪器科普文章)。

假如VEL这次选择了25,拉制完成后未操作设备时,可以在屏幕下方看到结果提示。其中**行表示该程序共循环了4次,**行表示这次的电极在程序的第1行结束,因为这个程序一共只写了1行,所以这就代表本次拉制用了4步。


此时应该将VEL改为24,重新拉制,记录步数,并依次递减,直到有一个VEL使其步数变为5,假设该VEL为22。然后VEL再从25依次递增,直到有一个VEL使步数变为3,假设为26。那么能使该电极拉制步数为4的VEL分别有23、24、25,选择中间那个值即可,如果得到的VEL只有两个,则取较大那个值。

确定了VEL后,在程序中将4步分为4行分别设置出来,在P1000中,可以在Line这一项下面点击“x1”,将其修改为“x3”,如下图所示,表示这一行重复3次,然后在**行按照**行的参数抄上去,再根据上文表格中的调整方法对*后一行进行调整,*后一行的参数会直接影响电极**的形状,而前面3行主要影响颈部形状。在P97中,调整方法同理,只是P97需要将所有行全部写出,无法单独设置某行进行重复。


电极拉制参数的设置主要就是这些,更加详细的内容,比如各个参数的具体含义及更加**的影响等细节部分可以阅读随包装附带的说明书和Cookbook进行了解。

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