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- 产品名称：质粒小量提取试剂盒
- 产品型号：PD1211-03
- 产品展商：Biomiga
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- 发布时间：2018-07-31
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简单介绍
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒采用离心柱高效专一吸附质粒DNA技术，操作简单快速，可从1~5mL**培养液中纯化提取10~30ug高纯度质粒DNA。
产品描述
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒从1~5mL **培养液中纯化提取10~30 ug 高纯度质粒DNA。
质粒小量提取试剂盒组成:
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Catalog#
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PD1211-02
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Preps
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100
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ezBind Columns
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100
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Buffer A1
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28 mL
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Buffer B1
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28 mL
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Buffer N1
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40 mL
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Buffer KB
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55 mL
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DNA Wash Buffer*
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22 mL
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Elution Buffer
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30 mL
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RNase A (20 mg/mL)
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2.8 mg
(140 µL)
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User Manual
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1
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保存条件：
RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它组分室温保存。
注意事项：
1、使用前请将适量乙醇加入DNA Wash Buffer，令乙醇终浓度为80%；
2、纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer；
3、若为-70℃甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒操作简要步骤：
1、接种新鲜的单个菌落到1-4 mL的LB培养基（含适量***），37oC震荡培养14-16小时。室温下10,000 x g离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
2、加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮**细胞。
3、加入 250 µL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀，然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。
4、加入350 µL Buffer N1, 立即反转多次，至溶液充分混匀，此时出现白色絮状沉淀。
5、室温下13,000 rpm离心10分钟（若上清中有白色沉淀，可再次离心）。
6、小心吸取离心后的上清液至带有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀），室温下13,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
7、可选: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室温下13,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
8、向离心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer（确保已加入无水乙醇），室温下，13,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。重复步骤“8”。
9、将离心柱放回高速离心机中，13,000 rpm室温下开盖离心2分钟，以彻底去除残留的乙醇。
10、将离心柱转至一个新的1.5 mL离心管中，向DNA柱的正中间加入50~100 µL（体积>50 µL）的ddH2O（pH在7.0-8.5之间）或Elution Buffer，室温放置2分钟，13,000 rpm 离心1分钟，洗脱质粒DNA。将洗脱液再加入到柱中，在13,000 rpm 离心1分钟，收集洗脱液。
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒操作流程：
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