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- 产品名称：BCA蛋白定量试剂盒
- 产品型号：编号: PW0104
- 产品展商：Biomiga
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- 发布时间：2018-07-08
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简单介绍
准确灵敏：BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000 μg/mL,加强法可检测到5μg/mL。
快速：45分钟内可完成测定。
可在微孔板中进行。
干扰因素小。
不同蛋白质分子的变异系数远小于Bradford。
不受低浓度的EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类的干扰。
标准曲线接近直线，可以单点定标。
产品描述
说明
产品组分
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组分
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规格
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Reagent A
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100 mL
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Reagent B
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2.5 mL
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Protein Standard (1mg/mL)
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5 x 1mL
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保存条件
蛋白标准贮藏在-20°C. 其它保存在4°C，有效期一年。
注意
·若发现试剂中有沉淀，可搅拌或在37°C 温育使其溶解，如发现**污染则应丢弃。
·高浓度的EDTA，EGTA，DTT，硫酸铵，脂类会影响检测结果，改用Bradford法测定。
·Reagent A和B应密封保存。
·Reagent A与Reagent B应密封保存。
·试剂具有腐蚀性，如接触皮肤眼睛等，请用大量水清洗，或就医。
操作步骤
1. 配置BCA工作液：根据标准品和样品数量，将Reagent A和Reagent B按照50:1的比例配置，充分混匀。该工作液室温下24小时内稳定。
2. 标准曲线绘制：
名称
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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Protein Standard(μL)
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0
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25
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50
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75
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100
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去离子水 (μL)
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100
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75
|
50
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25
|
0
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BCA工作液 (mL)
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2
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2
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2
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2
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2
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2
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样品 (μL)
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|
|
100
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混匀，在37°C放置30分钟，冷却到室温，测定A562的吸光度，根据标准曲线计算出蛋白浓度。
3.样品和试剂的比可以按比例放大或缩小，微孔检测时，可以按比例缩小，但总体积不小于100 μL。
附注：
以下是不干扰本方法测定的物质浓度：
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成分
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相容浓度
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成分
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相容浓度
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NP-40
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5.0%
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葡萄糖
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10 mM
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|
Emulgen
|
1.0%
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EDTA
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10 mM
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|
Hepes
|
100 mM
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Sodium Chloride
|
1.0 M
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DTT
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1 mM
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NaOH
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0.1 M
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Guanidine.HCl
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4.0 M
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Ammonium Sulfate
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1.5 M
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Triton X-100
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5.0%
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乙酸钠 pH5.5
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200 mM
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辛基糖苷
|
5.0%
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SDS
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5.0%
|
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Urea
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3.0 M
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Brij-35
|
5.0%
|
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蔗糖
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40%
|
Lubrol
|
1.0%
|
|
Glycine，pH 2.8
|
100 mM
|
CHAPS
|
5.0%
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