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- 产品名称:一步法RT-PCR反转试剂盒
- 产品型号:20次 50次 100次
- 产品展商:Biomiga
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- 发布时间:2018-07-13
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简单介绍
编号: RT0213-01 规格: 20 次
编号: RT0213-02 规格: 50 次
编号: RT0213-03 规格: 100次
产品描述
说明 :
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产品简介
一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系**用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液,能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间,该试剂盒为50 μl的反应体系。
试剂盒组分
产 品
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RT0213-00
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RT0213-01
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RT0213-02
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RT0213-03
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Reactions
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5
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20
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50
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100
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Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix
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5 μL
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20 μL
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50 μL
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100 μL
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2× Reaction mix (optimized bμffer contains dNTP and Mg2+)
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125 μL
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500 μL
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1.25 mL
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2×1.25 mL
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5 mM Magnesiμm Sμlfate
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125 μL
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500 μL
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1.0 mL
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2×1.0 mL
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dd H2O
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150 μL
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600 μL
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1.5 mL
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2×1.5 mL
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保存条件
该试剂盒-20°C保存,在此条件下可保存二年。
产品特点
方便的一管式设置
*佳的RT-PCR缓冲液及高效性
高度敏感性、特异性及重复性
推荐RT-PCR反应体系
建议用如下组成配制RT-PCR反应起始液:
组分
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50 μl 体系
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终浓度
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2× Reaction mix
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25 μL
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1×
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Enzyme mix
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1.0 μL
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Forward Primer (10 μM)
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1.0 μL
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200 nM
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Reverse Primer (10 μM)
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1.0 μL
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200 nM
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RNA template
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× μL
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Variable (0.01pg - 2μg)
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Final Volμme (μL)
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50 μL
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用dd H2O补足50 μL体系
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*如有必要,镁盐浓度可进一步优化。
1.将反应溶液在冰上解冻。
2.按下列热循环程序进行反应,以便cDNA合成之后立刻进行PCR扩增。
cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min
变性: 1 cycle: 94°C for 2 min
PCR 扩增: 40 cycles:
94°C for 15 s
55-65°C for 30 s
68°C for 1 min/kb
3.用凝胶电泳检测RT-PCR扩增产物。
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