[实验目的]
学习家兔呼吸运动的记录方法，观察各种因素对呼吸运动的影响并分析 其作用途径。
[实验原理]
呼吸运动是呼吸**节律性活动的反映。在不同生理状态下，呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节，其中较为重要的有呼吸**、肺牵张反射、本体感受性反射以及化学感受器的反射性调节。因此，体内外各种刺激可以直接作用于**部位或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。
[实验器材与药品]
哺乳动物手术器械1套，兔手术台，气管插管，注射器(20ml、5ml各1只)，50cm长的橡皮管1条，张力换能器，生物信号采集分析系统。（生产厂家;北京智鼠多宝生物科技有限责任公司）
1%****，3%乳酸，CO2 ，N2 ，生理盐水等。
[实验对象]
家兔
[实验步骤和方法]
1.手术步骤
(1)麻醉与固定 由耳缘静脉注射1%****(30mg/kg)，待兔麻醉后，仰卧位固定于兔台上。
(2)颈部手术 备皮后沿颈部正中切开皮肤约6~8cm并分离皮下组织，用止血钳钝性分离气管前面的肌肉，暴露气管。在气管两侧辨认并分离两侧迷走神经，在神经下穿线备用(勿结扎)。将甲状软骨以下的气管与周围组织分离，在气管下穿入丝线，于气管上段作一倒“T”形切口，插入“Y”形气管插管，用丝线结扎并固定气管插管，手术完毕后用生理盐水纱布覆盖手术切口部位。
(3)膈肌小片的制备 备皮后切开胸骨下端剑突部位的皮肤，沿腹白线向下切开2cm左右，打开腹腔，暴露出剑突软骨和剑突骨柄，辨认剑突内侧面附着的两块膈小肌，仔细分离剑突上附着的腹膜至膈小肌附着处，剪断剑突骨柄(注意压迫止血)，使剑突完全游离，即制备好膈肌小片。此时可观察到剑突软骨完全跟随膈肌收缩而上下自由移动。
2.呼吸运动的描记方法
用弯针钩住剑突软骨(针尖向上)，使游离的膈肌小片和张力换能器相连接，信号经第4通道输入MD-2000生物信号采集分析系统，由计算机描记呼吸运动曲线。此种描记方法可反映呼吸频率、呼吸深度以及呼吸的停止状态，缺点是在动物移动或稍有挣扎后，基线变化较大，不得不再次调整描记系统。
3.仪器 操作
(1)启动计算机，桌面上双击“DB088型”图标，进入db088型生物信号采集分析系统。
(2)点击菜单栏“实验”，在下拉菜单中依次选“生理学 实验”、“实验17呼吸运动调节”，点击“确定”，即进入呼吸调节实验界面。保留通道4，其余通道可关闭。界面左上角可见张力换能器界面，灵敏度调节为l-2，定标、调零已事先设定。
(3)采样 将鼠标移至左下角点击“记录”，计算机即开始连续采样，屏幕上出现呼吸运动曲线，点击“ESC” 或按空格键可停止采样。采样速度的调节是利用鼠标点击左下角的“快”或 “慢”按钮，使采样间隔调至64~256ms。屏幕有时无信号时，可点击屏幕右方的“基线”按钮，记录曲线会自动出现在屏幕上;或是将鼠标移至标尺处按住左键上下拖动，即可使曲线出现在屏幕上。实验中可选择“放大”或“缩小”按钮放大或缩小曲线的幅度，选择“压缩”按钮，调至“1:1”或“1:2”，点击“平滑”按钮可对曲线进行平滑，点击“50Hz”按钮可去除交流电干扰。
(4)标记 实验中或实验后可在“标记项目”下拉菜单中选取应标记的项目，点击“标记”图标，然后将鼠标移到需要标记部位，点击左键，就完成了标记。
(5)实验过程中如果需要查看前面的结果，可在停止采样的条件下，点击“重放”按钮、点击左向按纽或以鼠标拖动水平滚动条。
(6)测量 实验后用鼠标选中需要测量的一段曲线，点击“测量”图标，即可显示测量结果。
(7)图形编辑 用鼠标选中需剪切曲线，点击“剪切”图标，即可重组记录曲线，如对结果不满意，可恢复重新编辑。
(8)打印 同Word的打印操作相同。
(9)保存与退出
4.观察项目
(1)观察家兔正常呼吸运动曲线，分清吸气相与呼气相。
(2)CO2对呼吸运动的影响 将气管插管开口端与装CO2的球胆管相对，打开球胆管上的弹簧夹，使一部分CO2随着吸气进入气管(如用一小烧杯罩住气管插管开口端，因局部CO2浓度升高，效果会更明显)，观察吸入高浓度CO2后呼吸运动有何变化? 呼吸发生明显变化后，去除CO2的吸入。
(3)缺氧对呼吸运动的影响 将气管插管开口端与装N2的球胆管相对，打开球胆管上的弹簧夹，使一部分N2随着吸气进入气管(亦可用一小烧杯罩住气管插管开口端)，观察吸入高浓度N2后呼吸运动有何变化? 呼吸发生明显变化后，去除N2的吸入。
(4)H+对呼吸运动的影响 取5ml注射器，由耳缘静脉较快地注入3%乳酸2ml，观察呼吸运动的变化过程。
(5) 增加无效腔对呼吸运动的影响 把50cm长的橡皮管连接在气管套管的开口端，动物通过此橡皮管进行呼吸，此时呼吸运动将有何变化?呼吸发生明显变化后，应即去掉橡皮管。
(6) 切断迷走神经对呼吸运动的影响 分别切断两侧迷走神经干，比较迷走神经切断前后呼吸运动的变化。
[注意事项]
1.气管插管后，侧管要保持通畅。
2.制备膈肌小片时要小心操作，避免家兔出现气胸。
3.膈肌小片与换能器间连线的松紧度要适当。
4.每观察一个项目，要待家兔呼吸恢复正常后，才能进行下一步操作。