高效液相色谱 (HPLC) 分析需要去除可能干扰目标分析物准确检测的颗粒。在 HPLC 之前进行过滤可以减少杂质,但是可能会以浸提物的形式引入新的污染物。
了解针式滤器组件对溶剂的化学相容性再进行选择,可降低新污染物干扰 HPLC 分析的风险。
常见的样品制备方法有哪些?
准确的 HPLC 分析需要适当的样品制备,以z大限度地提高纯度并确保分析物浓度在检测范围内。常见的样品制备方法包括:
单个样品的稀释或离心足以z大限度地减少不溶性颗粒,以用于 HPLC。使用过滤装置进行样品过滤增加了一层额外的**保障,因为膜以物理方式分离不溶性颗粒,有助于防止出现不规则的色谱峰。针式滤器和无针式滤器是为自动采样处理多个样品的便捷选择。
然而,过滤装置本身可能是浸提物的来源,可能会影响数据质量,具体取决于它们与样品制备中使用的溶剂的相容性。
什么是浸提物?
浸提物是指从与样品溶剂接触的组件(例如,滤膜或外壳)释放的化合物。浸提物的量取决于组件的耐溶剂性以及涉及的温度和压力。
浸提物如何影响 HPLC?
如果这些化学物质可通过下游分析方法检出,它们就会干扰 HPLC 分析。浸提物可能会引入数据噪声,从而降低数据质量并导致不必要的 HPLC 故障排除。如果浸提物与目标分析物具有相同的保留时间,就存在较大问题。
如果不同滤器的浸提物不一致,洗脱速率便会不一致,这种情况给分析带来更大挑战。
哪些策略可以帮助减少浸提物?
选择与实验室使用的流动相溶剂化学相容性高的滤膜很重要。通常选用聚四氟乙烯 (PTFE)、聚偏二氟乙烯 (PVDF) 和再生纤维素 (RC) 膜,因为它们与常见的流动相溶剂(例如纯净水、乙腈和甲醇)高度相容。
建议用户联系生产商,获取有关滤膜中发现的浸提物水平的信息。如果生产商无法提供这些数据,用户可以用空白值样品(即,仅由流动相溶剂组成的样品)测试所选用的膜。
根据良好实验室操作规范,在可行的情况下,应丢弃针式过滤后的前 1 mL 或 2 mL 样品。大多数浸提物会洗脱进第1滴样品中。
还有哪些因素可能会影响膜的选择?
减少整个实验室的材料变化有利于整体一致性。减少变化的一种方法是统一采用一种或两种膜类型,例如 PTFE 或 RC,并以各种不同的规格进行应用。例如,可将相同的膜材料用于流动相过滤的圆形膜、手动制备所需的针式滤器以及自动过滤所需的无针式滤器。
标准化的另一个好处是需要储存的耗材更少。事实上,为每种外壳和膜材料组合保持库存并非总是可行或具有经济效益。