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怎样优化手性分离色谱柱


环糊精色谱柱在分离多种手性化合物方面具有独特性。在我的上一篇博客中,我讨论了各种手性化合物的单独色谱柱分离。今天,我想展示如何优化这种分离。线速度和升温速率的变化会极大地影响对映异构体的分离度。根据手性色谱柱的类型,初始 GC 柱箱温度会影响峰宽。色谱柱样品容量因化合物不同而异,过载会导致拖尾峰变宽并降低对映体分离。

线速度(柱流)

在我们的分析中,我们使用了氢气。氢气的*佳线速度约为 40 cm/s。然而,如图 1 所示,更高的流量/线速度 (60-80 cm/s) 可获得更好的分辨率。

手性分离的优化


图 1:作为线速度函数的分辨率因子。Rt-βDEXsa:40°C(内酯为 80°C)至 200°C @ 2°C/min。(保持 1 分钟)。氢气载气。

温度程序

手性分辨率可以随着温度斜坡速度的降低而提高。*佳温度程序为 1-2 °C/min(图 2)。

手性分离的优化


图 2:作为温度斜坡函数的分辨率因子。Rt-βDEXsa:40°C 至 200°C(保持 1 分钟)。线速度 80 厘米/秒。氢气载气

为了获得*佳手性分离,请使用:

  • 使用氢气载气时的线速度更快(60-80 cm/sec.)。
  • 较慢的升温速率 (1-2°C/min.)。
  • 适当的*低工作温度(40 或 60°C)。
  • 柱上浓度为 50ng 或更少。

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