凝胶纯化色谱
凝胶色谱是 1960 年代初期发展起来的一种分离和分析技术。 根据分离的对象是否为水溶性物质,凝胶色谱可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。
凝胶纯化色谱是我们今天要介绍的一种凝胶渗透色谱(GPC)。
什么是凝胶纯化色谱法?
凝胶纯化色谱是凝胶渗透色谱作为样品预处理方法的主要应用之一。
凝胶纯化色谱法是一种以惰性多孔凝胶为固定相的高效液相色谱(HPLC)方法,它主要基于尺寸排阻原理根据分子大小的差异来分离物质。
凝胶纯化色谱分离原理
当含有各种分子的样品溶液缓慢流过凝胶柱时,分子同时以两种不同的方式运动:垂直运动和静止运动。
由于直径大,大分子物质不易进入凝胶颗粒的微孔中,只能分布在颗粒中。 因此,在洗脱过程中向下移动的速度更快。
小分子不仅可以在凝胶颗粒之间的间隙中扩散,还可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。 在向下移动的过程中,小分子扩散到一个凝胶的缝隙中,然后进入另一个凝胶。 它们不断地扩散和进入,所以它们向下移动的速度比大分子要慢。 样品中的大分子先流出色谱柱,中等分子跟随,*后流出*小分子。
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