钻石刀须知
海德创业(北京)生物科技有限公司
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实验室常用diamond cutter处理不同种类不同硬度的样本,对于昂贵精密的diamond cutter,大家往往会认为它容易损坏,其实这是一种错误的认识。Diatome公司的diamond cutter不仅可以使用很多年,而且也能保证你一直获得满意的样本切片。重要的是,当你**次使用Diatomediamond cutter时,下面的说明或者警告还是有必要仔细阅读。
1. 仔细检查外包装盒没有损坏或打开过
2. 确认diamond cutter在蓝色塑料盒内
3. 小心拿取diamond cutter,注意保护不要损伤刀刃
4. 一旦取出diamond cutter,就要将其放置在一个**的位置
注:每把Diatomediamond cutter在包装前都经过了检查,它的刀刃是**洁净的。因只有经过了我们严格的高标准检查之后,它才能被运输,故**次使用时不需要清洗刀刃。
切片前的准备工作
切片前,样品块需要进行修整以确保**的切片。样品块修整的基本形状见下示意图:
切记,样品块的修整对得到高质量的切片非常关键;使用时,diamond cutter的刀锋必须与样品块的上下面平行;样品块不要太厚,如果太厚会增加切片时的压力。
我们工作中发现,经过树脂包埋的样品用我们提供的修整diamond cutter进行修整可以得到*好的结果。对于冰冻切片、生物样本、工业样本的修整,我们的低温钻石修整刀可以得出*好的结果。如果用剃须刀刀片进行修整,*好用新的无脂刀片进行,在修整*后几刀时,*好换新刀片进行。
警告:
如果使用比较旧的剃须刀片或者样本块太厚,有一种可能会发生:剃须刀刀刃的钢粒子脱落**在样本上,当你使用diamond cutter切割该样本时,上面的钢粒子非常容易破坏diamond cutter刃。假如初始样本块是使用玻璃刀制作,那么要注意仅使用洁净的新的刀刃,避免玻璃粒子粘在样本上。
切片
1.室温切片
下面讲述的都是影响或者决定你的切片质量的关键因素,切片前请仔细阅读。
- 样本块的放置:必须与diamond cutter的刀刃平行
- 样本块固定螺栓、刀把等都要拧紧
- diamond cutter参数:切角和切速要按照说明书的参数设定
- 水槽液体:液体水平面要与diamond cutter刃水平,水槽内的水要加到与刀刃接触为止。使用牙签将水槽的左右两边弄湿,但要注意不要碰到刀刃和粘接材料。
为了减少切片困难和延长diamond cutter的使用寿命,应该熟记下面的小窍门:
1. 不要加其它溶剂到水槽的蒸馏水里;它们或许溶解diamond cutter刃与水槽的粘接材料; 溶剂会降低水的表面张力;.溶剂或许破坏你的样本材料
2. 不要切超过*大允许厚度范围的样本
3. 样本块要充分包埋,不要太宽
4. 避免任何硬的物品如铜网、镊子等碰到diamond cutter刀刃
5. 不能在diamond cutter刃上干燥切片。
2. 低温切片
低温切片容易发生样本粘刀、卷曲、聚团或者漂移等问题,引起这些问题的主要原因就是低温腔静电。温度越低,现象越明显。为了解决这些问题,使低温切片和室温切片一样容易,Diatome公司推荐使用Static-Line" II 静电消除器,在样本修整和切片时都使用静电消除器,这样您就会获得比使用玻璃刀好得多的切片,样本几乎没有压缩变形并且非常均匀。
目前广泛应用的低温切片是Tokuyasu技术,针对这种切片技术,我们发现如下两条规律很适合diamond cutter:
1. 修整样本或者半薄切片时温度为: - 80°C
2. 超薄切片时温度为: -110°C to -120°C
切片后刀的清洁
1.方法一
取走切片,迅速移除不用的切片杂物,然后按照下面的步骤清洁刀刃:
1).清空刀槽然后将其再安装到切片机上.
2).使用无脂剃刀将我们提供的苯乙烯棒切出一个45º斜面
3).用清洁棒沾取100%乙醇,抖落多余的乙醇
4).清洁棒无压力滑过diamond cutter刃,可以重复操作
这种清洁方法是比较成熟和操作简便的,所以使用较为普遍。但要特别注意,操作中清洁棒不要接触到粘结区(刀刃与基座),否则会给diamond cutter带来伤害。
备注:对于聚合不是很好的样本块,切片之后再进行如上所述机械方法清洁**是必要的.
2.方法二
如果你对于方法一的清洁不满意,可以使用方法二看看效果。
切片快速移开后,开始刀的清洁工作:
ⅰ使用毛圈或睫毛移除所有切片后剩余杂物
ⅱ使用蒸馏水彻底冲洗diamond cutter
ⅲ使用干净的压缩空气吹干diamond cutter
3.方法三
如果干燥的切片或残余粘在刀刃上,采取如下步骤
ⅰ将diamond cutter放进蒸馏水中
ⅱ加一到两滴中性洗涤液到蒸馏水中
ⅲ浸泡一晚
ⅳ取出diamond cutter,再用蒸馏水清洗
ⅴ*后再按照方法一的说明进行操作
对于低温diamond cutter,按照如下步骤进行清洗操作:
ⅰ从低温腔室里取出解剖刀
ⅱ用干净的水冲洗,晾干
ⅲ重复方法一各步骤(注意,低温切片diamond cutter建议用50%的乙醇代替100%的乙醇)
在使用Diatomediamond cutter过程中常见的问题
1. 无法弄湿diamond cutter刃
解决办法:用无水酒精和Diatome清洁棒处理刀刃;将水槽加满蒸馏水,直到快溢出为止。等待几分钟后,再将多余的蒸馏水去除,用Diatome清洁棒反复滑过diamond cutter刃进行清洁;
假如你怀疑是因为diamond cutter刃的粘接材料被损坏从而影响不能湿润刀刃,那么请立即联系我们,我们会安排取回这把diamond cutter,重新粘接,再归还给您。
2. 样本块表面潮湿
原因:
1. 对于环氧树脂材料,一般由静电造成
2. 对于异丁烯酸盐(脂),这些树脂一般易吸湿受潮(比如LR White等)
解决办法:
对于环氧树脂:
- 提高室内适度
- 降低水面位置
- 用滤纸干燥样本块表面
- 使用静电消除器
对于异丁烯酸盐(脂):
3.切片褶皱
由很多原因引起:
- 外部振动
- 切片机质量有问题
- 相关固定螺栓没有拧紧
- 切割压力太大
- 切割后角太小(引发切割面和diamond cutter面之间的产生摩擦力
解决办法:
- 改变切片机位置
- 检修切片机
- 紧固相关螺栓
- 减小样本块宽度
- 增大切割后角1-2º
4.压力变形
原因:
- 样本块太软
- diamond cutter角度太大
- 刀刃变钝
- 切割后角太大或者切割速度太快
解决办法:
- 硬化样本块
- 将diamond cutter从45º更换小角度的
- 将刀发回工厂由Diatome公司的专业工程师评估
- 减小切割后角1-2º和降低切割速度从1mm/秒到0.5mm/秒
5. 刀痕(豁口)
切片出现刀痕时,大多数的diamond cutter都需要重新磨削了。
原因:
- 你的手指或者其它硬的东西碰到了刀刃
- 修整样本块时**了其它粒子
- 样本本身含有的较硬的粒子
- diamond cutter的多年使用后疲劳所致
解决办法:
- 避免其它物品碰到刀刃
- 在制样开始就要尽力保证样本的纯净,从取样到固定、包埋、修整都要小心其它粒子的污染**
6. 条痕
原因:
- 刀刃不完整
- 包埋样本时,聚合不好
- 样本块本身不均一
解决办法:
- 确认样本已经完全充分聚合
- 更换样本块
- 改变切割位置