细胞破碎仪的机械破碎技术
在生物制品的分离提取中,如果目标物质是细胞外产物(如霉菌产生的葡糖淀粉酶等),提取过程比较简单,只需要固液分离即可得到澄清的滤液,然后分离纯化操作;如果目标物质是细胞内产物或多细胞生物组织中的各种生物分子(如碱性磷酸酶等细胞内酶、部分外源基因表达工业或植物细胞产物等),则需要将组织破坏,所以目标物质完全释放到溶液中而不会失去其生物活性。 不同的生物体或同一生物体不同部位的组织,细胞破碎的难度和容易程度不同,所使用的方法也不同。例如,动物器官的细胞膜很脆弱,很容易破裂。植物和微生物对由更强的纤维素和半纤维素组成的细胞壁,应采用特殊的细胞破碎方法。 电芯破碎机的破碎方法 根据是否有外力作用,电池断路器的断裂方式可分为机械法和非机械法两大类。细胞在机械破坏中所受到的机械力主要包括压缩力和剪切力。非机械破坏主要是利用化学或生化试剂(如酶)改变细胞壁或细胞膜的结构以释放细胞内物质。 Cell Breaker 机械破碎法 通过机械运动产生的剪切力作用使细胞破碎的方法称为机械破碎法。机械粉碎法是工业规模细胞粉碎的主要方法。具有处理量大、粉碎效率高、速度快等特点,适用于粉碎植物材料和细 菌细胞。根据使用的破碎机械不同,可分为糖化法、珠磨法、均质法和超声波破碎法。 1、细胞粉碎机糖化法。利用粉碎机高速旋转的刀片锁产生的剪切力来破坏组织细胞,是一种更为猛烈的破坏细胞的方法。通常可以先用家用食品加工机打碎组织,然后用10000~20000r/min的内刀式组织粉碎机(即高速分散机)打碎组织细胞,为防止发热或温升过快,一般为10~20s,停10~20s,可重复多次。 粉碎法适用于粉碎动物组织、内脏、植物种子、蔬菜幼叶、较软的果蔬等物料。但由于旋转刀片的机械剪切力大,粉碎过程中温度上升快,不适用于核酸等生物大分子的提取。 2、细胞破坏法。思考是常态在机械破碎细胞的方法中,玻璃珠与细胞悬液快速搅拌。由于研磨作用使细胞破碎,常用的工业设备是高速珠磨机。该方法适用于大多数微生物细胞的破碎。例如,用高速湿式珠磨机分离纯化重组人肿瘤坏死因子时,用间歇式珠磨机破碎菌体3分钟,玻璃珠直径为0.25~0.50mm,珠子用量为粉碎室总体积的85%,搅拌速度1500r/min,4℃,15000r/min离心15min,去除细胞碎片。在此条件下,目标蛋白回收率可达90.3%,活性回收率为85.8%。 3、用细胞破碎器高压匀浆法。高压均质粉碎又称高压剪切粉碎法。破碎原理是:细胞悬液在高压下从阀座与阀体之间的环形间隙高速喷射,然后撞击碰撞环。它在剪切力和剪切力的共同作用下被破坏。
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