培育细胞的无菌操作一般步骤

细胞的无菌操作可参考以下步骤。

1. 实验施行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯映射30-60 分钟**，以70 ****ethanol 揩拭无菌操作台面，并开启无菌操作飓风扇运转10 分钟后，才着手实验操作。每每操作只处置一株细胞株，且纵然营养物质相同亦不共享营养物质，以防止差错淆惑或细胞间污染。实验完结后，将实验东西带出办公台，以70 **** ethanol 揩拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再施行下一个细胞株的操作。

2 办公担任职务的人应注意自身的**，须穿戴实验衣及手套儿后才施行实验。对于来自人的总称或是病毒感染的细胞株应尤其谨慎操作，并挑选合适等级的无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应防止引动aerosol 的萌生，谨慎毒**品，例如DMSO 及TPA 等，并防止尖锐针头的损害等。

3. 无菌操作办公地区范围应维持保洁及宽阔，不可缺少东西，例如玻璃管架、吸管、汲取器或吸管盒等可以短时间之内安放，其他实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 **** ethanol揩拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面的中央无菌地区范围，勿在边缘的非无菌地区范围操作。

4. 谨慎取用无菌的实验东西，防止导致污染。勿碰触吸管尖头部或器皿瓶口，亦不要在敞开的器皿正上方操作实验。器皿敞开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾侧约45° 角取用，尽力勿将瓶盖盖口朝上安放桌面儿。

 5. 定期检验测定下面所开列项目：

5.1. CO2 钢瓶的CO2 压力

5.2. 二氧化碳培养箱的CO2 液体浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周改易)。

5.3. 无菌操作台内的airflow 压力，定期改易太阳灯管及HEPA 过淋膜，预滤网(300钟头/预滤网，3000钟头/HEPA)。

6. 水槽可添加**剂(Zephrin 1:750)，定期改易水槽的水。