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BACTH System Kit， EUK001/细菌双杂交系统试剂盒（腺苷酸环化酶）
日期：2025-02-26 03:03
浏览次数：102
摘要：
Euromedex 细菌双杂交（BACTH, “细菌腺苷酸环化酶双杂交”）系统是检测和表征体内蛋白质-蛋白质相互作用的一个简单又快速的方法。
与需要专业知识的酵母菌双杂交系统相比，BACTH 提供与大肠杆菌一起工作的所有优点。
易达到的的微生物学和分子生物学技术（质粒制备，转化效率，PCR ...）
它利用了来自百日咳杆菌的腺苷酸环化酶的催化结构域（CyaA），由两个互补片段 T25 andT18 组成的这个事实，当物理分离时不起作用。
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Euromedex 细菌双杂交（BACTH, “细菌腺苷酸环化酶双杂交”）系统是检测和表征体内蛋白质-蛋白质相互作用的一个简单又快速的方法。
与需要专业知识的酵母菌双杂交系统相比，BACTH 提供与大肠杆菌一起工作的所有优点。
易达到的的微生物学和分子生物学技术（质粒制备，转化效率，PCR ...）
它利用了来自百日咳杆菌的腺苷酸环化酶的催化结构域（CyaA），由两个互补片段 T25 andT18 组成的这个事实，当物理分离时不起作用。
当这两个片段融合到相互作用的多肽时，X 和 Y，这些杂交蛋白的异二聚化导致 T25 和 T18片段之间的功能互补，因此导致 cAMP 合成。
通过重构的嵌合酶产生的环 AMP 与分解代谢激活蛋白 CAP 结合。 cAMP / CAP 复合物是大肠杆菌中基因转录的多效调节剂。 它打开了几个常驻基因的表达，包括参与乳糖和麦芽糖分解代谢的 lac 和 mal 操纵子的基因。
因此，细菌能够利用乳糖或麦芽糖作为独特的碳源，并且可以在指示剂或选择性培养基上容易地区分。
试剂盒的成分：
BACTH 菌株
BTH101, LB/DMSO 储备液（BACTH 测定报告菌株）1 ml EUB001
DHM1, LB/DMSO 储备液（BACTH 测定报告菌株）1 ml EUB002
BACTH 向量pKNT25，超螺旋，10μg（0.5μg/μlTE 缓冲液）20μlEUP-25N
pKT25，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 缓冲液中）20μlEUP-25C
pUT18，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 缓冲液中）20μlEUP-18N
pUT18C，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 缓冲液中）20μlEUP-18C
对照质粒
pKT25-zip，超螺旋，1μg（0.05μg/μl，在 TE 缓冲液中）20μlEUP-25Z
pUT18C-zip，超螺旋，1μg（0.05μg/μl，在 TE 缓冲液中）20μlEUP-18Z
储存于-20°C
系统试剂盒已经由 D. Ladant 博士小组在巴斯德研究所(Karimova et al., 1998, Proc. Natl. Acad.Sci. U.S.A. 95:5752).开发。
