目的: 利用大肠埃希菌原核表达并纯化asprosin蛋白,研究其对心功能改善的影响。
方法: 从GenBank获取asprosin编码序列,根据大肠埃希菌密码子偏好性进行密码子优化,全基因合成,连接于表达载体,进行IPTG诱导表达并纯化。通过对冠脉左前降支结扎再放松,建立小鼠心功能损伤模型。将30只小鼠随机分成3组:假手术组(sham)、心功能损伤组(MI/R)和心功能损伤并注射重组蛋白组(MI/R+rAsp)。通过心动超声检测左室功能,对心功能损伤程度进行评价,进而研究Asprosin对心功能改善的影响。
结果: 经过原核表达并纯化,目标蛋白纯度大于95%,内**含量小于<0.1 EU/μg蛋白,适于进行细胞及动物研究。成功建立了心功能损伤模型,与单纯损伤组相比,外源给予重组asprosin蛋白后,小鼠心脏心功能明显改善(P<0.05)。
结论: Asprosin蛋白具有抑制心功能损伤,改善心功能的作用。
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