裸鼠肝癌模型构建:取对数生长期细胞消化后离心,定量的PBS缓冲液及培养基将细胞吹打成3个不同细胞浓度组。将裸小鼠分为6组,每组10只,将以PBS缓冲液混悬的细胞和以完全培养基混悬的细胞分别接种在小鼠左后肢腋下及右后肢腋下,以每个接种部位0.2ml皮下注射,注射完毕缓缓拔出注射器,酒精棉球按压穿刺部位10s左右以防细胞混悬液流出。
裸鼠肝癌模型注意:接种前进行空白混悬剂皮下注射,观察空白混悬剂PBS缓冲液及培养基对裸鼠的影响。每隔一日用游标卡尺测量肿瘤的长径、短径,计算肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。两周后,颈椎脱臼处死荷瘤小鼠,剪开肿瘤生长处的皮肤,取出肿瘤称重。
方法比较:裸鼠肝癌模型的建立中,接种的条件尤为重要。为了给癌细胞稳定的生长环境和充足的生长空间,一般选择在动物的皮下接种细胞或肿瘤组织。直接接种肿瘤组织的办法具有肿瘤组织生长快速的、大小均匀的特点,但操作复杂,需要对动物进行麻醉、切口、缝合等。对于裸鼠来说,这无一不增加了感染的风险,影响术后生存质量。腹水癌细胞皮下注射的方法也需要先对细胞进行在腹水中的增殖、分离和稳定传代,增加了工作量。相比较这两种方法,癌细胞直接接种的方法简单、快速、有效、风险低。