ATP荧光检测仪知识问答
1. 什么是ATP?
答:ATP(三磷酸腺苷)是一种作为活细胞主要能量来源的有机分子。动物、植物、**、酵母菌和霉菌细胞都能产生并分解ATP以完成一系列的生物进程,包括肌肉收缩、光合作用和各种蛋白质的制造。
2. 为什么用ATP作为有效清洁的指标?
答:ATP存在于所有的有机物中,多数食品本身也都含有一定量的ATP,因此检测ATP可以作为判断是否洁净的指标。生物荧光仪与快速ATP荧光检测试剂盒配合使用,采用生物发光技术检测残留的ATP以作为表面清洁度的指标。表面ATP的存在表明表面没有充分清洗,有滋生**的可能。残渣中也可能含有某些有害物质如潜在的过敏原等。
3. 所有的食品中都含有ATP吗?
答:大多数食品本身都含有一定量的ATP,但食品的加工和烹饪过程会降低ATP的水平。
4. 可以将RLU数和CFU计数进行对比吗?
答:生物荧光仪只能检测表面存在的总ATP,但它不能区分ATP是来自于微生物产生的亦或是因未充分清洗而残留在表面上的。所以不能直接将ATP荧光仪测定的RLU读数与标准平板计数相对比。但是,ATP水平与微生物数目有着密切的相关性。
5. ATP荧光检测仪工作原理?
答:ATP荧光检测仪采用化学反应检测ATP,用快速ATP荧光检测试剂盒采集标本。ATP采样棒被缓冲液浸湿,这样有助于从干燥或湿润的表面提取生物物质(ATP)。ATP采样棒也含有一种可以冲破生物膜的试剂,使其下可能存在的生物体暴露出来。标本采集后,ATP采样棒应浸泡在能将细胞内ATP释放出来的容剂中。而后细胞内部释放出的ATP、以及ATP采样棒从物体表面抹取的ATP再和独特的液体试剂一起反应。检测的液体试剂含有两种萤火虫酶---荧光素和荧光素酶,虫荧光素和虫荧光素酶在ATP存在的条件下会发光。发出的光可由ATP荧光仪进行检测。检测的发光量与ATP的总量成正比。数值越高,表明ATP的量越多,也就意味着表面的残留物越多。
6. 数字表示什么?
答:ATP荧光仪以RLU(相对光单位)数值显示结果。在ATP采样棒中发生的ATP反应所产生的光以光子的形式发散出来。光子是微小的能量束,也是光的基本单位。ATP检测仪对这些光子进行检测后直接以RLU数值的形式显示出来。ATP检测仪检测的光子数量越多,RLU的数值就越大。这种线性比例使得人们很容易在洁净与不洁表面之间做出判断。
ATP荧光仪检测的是总的ATP量,这些ATP来自**、酵母菌和霉菌体内以及食品加工设备表面的食物残渣中。所以RLU读数与微生物菌落形成单位(CFU)并不相同。由于ATP荧光仪检测总ATP,它不能分辨其显示的RLU读数是微生物体内的ATP检测值还是残留物中的ATP检测值,或者是两者的结合。因此不能在ATP/RLU数值和标准平板计数之间进行比较。在没有食物残渣存在的情况下微生物很容易被**剂杀死,所以如果设备表面不含ATP或ATP水平很低,表明没有或很少有食物残渣存在,此时**剂的使用效果*好。
7. 拭抹什么样的区域?
答:需要拭抹的主要是食品接触的区域和难以清洗的区域。食品接触区域包括食品直接和间接接触的表面。直接接触区域指那些如有污染存在会直接污染产品的区域,因为进入这些区域后,不再有****等步骤。间接接触区域指有冷凝物溅出、或有可能有灰尘或液体滴落或进入产品的区域。难清洗区域包括漏斗口、O环、管口以及表面不规则的区域、角落、沟槽和缝隙。
8. 建议使用的限定值是多少,应如何确定自己的限定值?
答:
仪器 | 初始设定指导 |
通过 | 警告 | 不合格 |
ATP荧光检测仪 | < 10 | 11-29 | > 30 |
这些初始化设定数值由不同仪器、表面和日常使用的平板计数所决定。我们建议您在设定自己的初始化数值时,应结合平板计数和ATP拭抹值,或使用以下提供的两种“建议实施办法”中的一种。
在使用我们提供的初始化设定时,读数小于10RLUs表明表面洁净;读数在11-29RLUs之间是警示表面没有彻底清洁;读数大于30RLUs表明表面很脏。
如果您没有参照这些指导数值,而且已经建立了自己公司的指导数值,那么我们建议您参照实行以下两点:
建议实施办法
1) 确定控制点和关键控制点。
2) 清洁产品表面。
3) 在几个不同位置、连续几天进行ATP卫生监控检测以得出20-50个结果。计算这些RLU数值的平均值和标准偏差(s.d)。
4) 按以下方式设置限定值:
5) Pass(通过) <= Mean RLU
6) Caution (警告) >= Mean RLU < Mean + 3 (s.d)
7) Fail (不合格) >= Mean RLU + 3 (s.d)
8) Pass (通过) 0-10 RLU
9) Caution (警告)11-29 RLU
10) Fail (不合格) > 30 RLU
10)定期重新计算以更新限定值,提高标准。
可选择的程序
1)确定质控点和关键质控点。
2)彻底清洁产品表面,重复两到三次以到达*佳清洁度。
3)在每个位置上进行ATP 卫生监控检测,重复检测5-10次。
4)计算认为是通过标准的RLU平均数值。
5)将通过标准增加2到3倍即为不合格值。
6)警告值介于通过与不合格值之间。
9. ATP快速荧光检测试剂盒与传统的微生物平板计数的比较
● 与平板计数的相关性为80-90%,但不会达到100%;
● 没有统计上的显著差异;
● ATP与CFUs间的相关性表明ATP的监控可对表面/机器是否达到运转所要求的洁净度做出快速判断;
●使用者一旦确定了与之采用的CFUs水平相对应的RLU起始数值,就无需在以后的工作中再进行大量的微生物检测;
● ATP检测可从根本上防止产品受到污染,减少了因产品不合格给厂商造成的损失。
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