沉降菌检测计划--ATP荧光检测仪技术文章
通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经若干时间,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室(区)的洁净度。
二. 适应范围
工厂所有洁净室(区)包括灌装车间和化验室洁净工作台的沉降菌测定和环境验证。本次测试对象为灌装车间。
三. 测试状态
l 沉降菌测试前,被测试洁净室(区)已经过**。
l 沉降菌测试前,被测试洁净室(区)的温湿度须达到规定的要求
l 测试状态暂定为静态
四. 测试人员
l 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。
l 静态测试时,室内测试人员不得多于二人。
五. 测试时间
空气净化系统运行时间大于30分钟后开始测试
六. 测试步骤
1. 配制培养基
2. 制备培养平皿
l 将培养皿的培养皿置于121℃湿热**20min或180℃干热**2h。
l 将培养基加热溶化,冷至45℃时,在无菌操作要求下降培养基注入培养皿,每皿约15mL。
l 待琼脂凝固后,将培养基平皿倒置于30℃~35℃恒温培养箱中培养48h,若培养基平皿上确无菌落生长,即可供采样用。
3. 采样
l 采样点的位置离地0.8m~1.5m左右(略高于工作面)
l 打开培养皿盖,使培养基表面暴露0.5h,再将培养皿盖盖上后倒置
4. 培养
l 全部采样结束后,将培养平皿倒置于恒温培养箱中培养。
l 在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于48h。
l 每批培养基应有对照试验,检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养
5. 菌落计数菌落计数
l 用肉眼直接计数,标记或在菌落计数器上点计,然后用5~10倍放大镜检查,不否遗漏。
l 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2 个或2个以上菌落计数。平均菌落数的计算,公式如下:
平均菌落数M= (M1+ M2+。。。。。。+ Mn)/ n
式中:M——平均菌落数;M1——1号培养皿菌落数;
M2——2号培养皿菌落数;Mn——n号培养皿菌落数;
n——培养皿总数。
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